利用T细胞受体重排删除环和TCRBV克隆谱型研究异基因造血干细胞移植后T细胞免疫重建

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目的 通过T细胞受体重排删除环(TREC)和T细胞受体(TCRBV)克隆谱型研究异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后T细胞免疫重建.方法 应用实时PCR的方法定量检测43例3组不同类型allo-HSCT后及70名正常供者TREC水平;应用RT-PCR扩增其中24例3组不同类型allo-HSCT后及5名正常供者的外周血的TCRBV 24个家族的基因序列,利用基因扫描的方法判断TCRBV家族的克隆表达、互补决定区3(CDR3)克隆性质及计算BV家族的利用率.结果 移植前患者TREC定量检测结果为(335.1±782.5)拷贝/105细胞,明显低于正常人.3组在移植后3个月TREC含量均明显下降,同胞相合骨髓移植(MSD-BMT)组TREC恢复快于其他两组,且在移植后24个月基本恢复到移植前水平.单倍型骨髓移植(HID-BMT)组的TREC恢复延迟.在移植后3~19个月内TCRBV CDR3克隆谱型仍处于不均一状态,在6~16个BV家族中有表达.多克隆表达率在33%~48%,其余为单克隆或寡克隆增生,且分布在24个不同的BV家族,未见共用的BV家族.结论 通过TREC和TCRBV克隆谱型分析,移植后3~24个月,胸腺输出初始T细胞数量低水平及TCRBV家族克隆性利用.单倍型骨髓移植后T细胞免疫缺陷更严重,与临床经过一致.
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