【摘 要】
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目的克隆霍乱弧菌O139临床菌株的甘露糖敏感血凝素（Mannose-Sensitive Hemagglutinin，MSHA）基因，构建原核表达系统，鉴定重组表达产物的免疫反应性。方法高保真PCR扩增mshA基因，T—A
【机 构】
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温州医学院检验医学院,温州医学院细胞与分子医学研究所,温州医学院生物学实验教学中心
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目的克隆霍乱弧菌O139临床菌株的甘露糖敏感血凝素（Mannose-Sensitive Hemagglutinin，MSHA）基因，构建原核表达系统，鉴定重组表达产物的免疫反应性。方法高保真PCR扩增mshA基因，T—A克隆后测定核苷酸序列并构建原核表达系统pET-28a（＋）-mshA—E．coli BL21（DE3），IPTG诱导目的重组蛋白（rMSHA）表达、Ni—NTA亲和层析法收集蛋白；Western blot鉴定其免疫反应性。结果所克隆的mshA基因与GenBank报道的（AE004128）序
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