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目的 重组表达人a—enolase蛋白作为抗原,研究胆道闭锁患儿血清中抗a-enolase抗体出现情况及其意义。方法提取肝组织总RNA,逆转录合成cDNA,PCR扩增a—enolase基因全长,构建原核表达质粒,在大肠杆菌中表达并分离纯化重组的a-enolase蛋白。用ELISA检测我实验室于2006年1月至2011年1月收集的胆道闭锁患儿血清标本139例、对照组患儿49例,分析血清中抗a-enolase的IgG或IgM抗体的出现情况。将实施Kasai手术后随访时间大于2年的患儿按ELISA检测(0D值)不同进行分组,比较两组之间6个月内褪黄率、反复胆管炎的发生率以及2年生存率之间的差异,分析该抗体的出现与预后的关系。结果胆道闭锁组OD值〈0.5,0.5~1.0,≥1的例数分别是22例、61例和56例,对照组分别是33例、12例和4例。两者分布差异有统计学意义(P〈0.05)。Kasai术后随访时间大于2年的患儿共78例,按照OD值的不同分为2组(〈0.85和〉0.85),两组患儿6个月内退黄率分别是47%和80%,两组差异有统计学意义(x2=9.018,P=0.003);反复胆管炎的发生率为58%和30%,两组差异有统计学意义(x2=6.617,P=0.013);2年生存率分别是47%和60%,两组差异无统计学意义(x2=1.251,P=0.263)。结论部分胆道闭锁患儿血清中有抗a—enolase的IgG或IgM抗体出现,针对a-enolase的体液免疫反应可能参与了胆道闭锁的发生过程。抗体水平的升高有利于短期预后的恢复,对长期预后的影响仍需进一步确认。