目的 研究HBsAg主蛋白对肝细胞中脂代谢基因表达的影响. 方法 将PCR扩增C型HBV主S基因(SHBs)定向克隆至pcDNA3.1(+)载体中,重组质粒pcDNA3.1-SHBs与pcDNA3.1分别转染HepG2细胞,筛选出稳定转染细胞株.用实时定量PCR和Western blot法检测两细胞株中脂代谢相关基因mRNA及蛋白水平表达差异. 结果 成功建立稳定表达SHBs的细胞株HepG2-pn3.1-SHBs及空质粒对照细胞株HepG2-pn3.1-neo.实时定量PCR检测相关基因表达差异结果显示:HepG2-pn3.1-SHBs细胞组中基因烯酰辅酶A水合酶、载脂蛋白A、脂蛋白脂酶mRNA相对表达水平较低,分别与HepG2-pn3.1-neo细胞组比较(0.161±0.043对比0.210±0.022,t=2.479;0.031±0.007对比0.094±0.055,t=2.752;0.770±0.036对比0.982±0.031,t=10.914),P值均＜0.05,差异均有统计学意义；而HepG2-pn3.1-SHBs细胞组基因乙酰辅酶A羧化酶、胆固醇调节元件结合蛋白-1c mRNA相对表达水平较高,分别与HepG2-pn3.1-neo细胞组比较(0.113±0.027对比0.059±0.022,t=-3.757;0.019±0.002对比0.015±0.001,t=-4.330),P值均＜0.05,差异均有统计学意义.两组肉毒碱脂酰辅酶A转移酶-1、过氧化物酶体增生物激活受体α的基因转录水平比较,差异虽无统计学意义,但呈减弱趋势.Westem blot结果显示上述基因蛋白水平的变化趋势与mRNA水平一致.结论 SHBs能改变脂肪酸合成,分解相关基因的表达,但HBsAg是否直接导致肝细胞脂肪变性尚不明确,值得进一步研究。
乙型肝炎表面抗原主蛋白对HepG2细胞脂代谢基因表达的影响
【摘 要】
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目的 研究HBsAg主蛋白对肝细胞中脂代谢基因表达的影响. 方法 将PCR扩增C型HBV主S基因(SHBs)定向克隆至pcDNA3.1(+)载体中,重组质粒pcDNA3.1-SHBs与pcDNA3.1分别转染HepG2细胞,筛选出稳定转染细胞株.用实时定量PCR和Western blot法检测两细胞株中脂代谢相关基因mRNA及蛋白水平表达差异. 结果 成功建立稳定表达SHBs的细胞株HepG2-p
【机 构】
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362000泉州,福建医科大学附属第二医院消化内科,福建医科大学附属第一医院肝病中心,福建医科大学附属第一医院肝病中心,福建医科大学附属第一医院肝病中心,福建医科大学附属第一医院肝病中心,福建医科大学
【出 处】
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中华肝脏病杂志
【发表日期】
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2013年21期
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