【摘 要】
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为提高大豆过氧化物酶(soybean peroxidase,SBP)的活性及研究该酶一级结构与酶活性间的关系,采用连续易错PCR方法对大豆过氧化物酶基因(sbp)进行了2轮随机突变,将第二轮易错P
【机 构】
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西北师范大学生命科学学院,甘肃省医学科学研究院,兰州理工大学生命科学与工程学院,
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为提高大豆过氧化物酶(soybean peroxidase,SBP)的活性及研究该酶一级结构与酶活性间的关系,采用连续易错PCR方法对大豆过氧化物酶基因(sbp)进行了2轮随机突变,将第二轮易错PCR产物与质粒载体pPICZα-A分别进行双酶切,经T4DNA连接酶催化连接后,CaCl2法转化重组质粒pPICZα-A-sbp至大肠杆菌DH5α中,成功构建出sbp随机突变文库,库容量约为1.77×106 cfu。
In order to improve the activity of soybean peroxidase (SBP) and to study the relationship between the primary structure and enzyme activity of the enzyme, the soybean peroxidase gene (sbp) A second round of error-prone PCR products and plasmid vector pPICZα-A were double digested, respectively, after T4DNA ligase catalytic ligation, CaCl2 transformation of recombinant plasmid pPICZα-A-sbp to E. coli DH5α, the successful construction of sbp Random mutation library, the library capacity of about 1.77 × 106 cfu.
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