【摘 要】
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目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)唐氏综合征细胞粘附分子反义1(DSCAM-AS1)靶向miR-627-3p对人皮肤鳞状细胞癌增殖和侵袭能力的影响和分子机制.方法 采用实时荧光定量PCR(RT-q
【机 构】
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沈阳市第七人民医院皮肤科 沈阳市, 110003
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目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)唐氏综合征细胞粘附分子反义1(DSCAM-AS1)靶向miR-627-3p对人皮肤鳞状细胞癌增殖和侵袭能力的影响和分子机制.方法 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测DSCAM-AS1和miR-627-3p在人永生化表皮细胞HaCaT和3种皮肤鳞状细胞癌细胞(SCC13、A431和HSC-5)中的表达水平.将DSCAM-AS1小干扰RNA、miR-627-3p模拟物分别转染A431细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖率,transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,蛋白质印记(Western blot)检测细胞周期素D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶2(MMP2)和MMP9蛋白表达.荧光素酶分析验证DSCAM-AS1对miR-627-3p的靶向调控能力.Western印迹检测DSCAM-AS1和miR-627-3p对磷脂酰肌醇-3-羟激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路的调控能力.结果 DSCAM-AS1在3种皮肤鳞状细胞癌细胞中的表达量显著高于HaCaT细胞,miR-627-3p在3种皮肤鳞状细胞癌细胞中的表达量显著低于HaCaT细胞(P<0.05).干扰DSCAM-AS1或过表达miR-627-3p后,A431细胞CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白的表达显著降低,细胞增殖率、细胞迁移和侵袭数量显著降低(P<0.05).DSCAM-AS1靶向负性调控miR-627-3p表达.与干扰DSCAM-AS1表达比较,同时干扰DSCAM-AS1和miR-627-3p表达后A431细胞CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白的表达显著升高,细胞增殖率、细胞迁移和侵袭数量显著升高(P<0.05).干扰DSCAM-AS1后,A431细胞p-PI3K、p-AKT蛋白表达显著降低(P<0.05).与干扰DSCAM-AS1比较,同时干扰DSCAM-AS1和miR-627-3p后A431细胞p-PI3K、p-AKT蛋白表达显著升高(P<0.05).结论 干扰DSCAM-AS1通过靶向miR-627-3p抑制PI3K/AKT信号通路从而抑制皮肤鳞状细胞癌增殖、侵袭和迁移.
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