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目的:研制猪流感病毒抗H1亚型HA特异性单克隆抗体(mAb).方法:构建 H1 亚型猪流感病毒A/Swine/Guangdong/LM/2004(H1N1)HA基因表达质粒,基因免疫6～8周龄雌性BALB/c小鼠,加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤细胞 Sp2/0进行融合.通过ELISA、 HI试验筛选阳性克隆.应用ELISA、 HI 试验和Western blot试验测定mAb的反应性和特异性.结果:共获得3株分泌抗H1亚型猪流感病毒HA蛋白的杂交瘤细胞株,分别命名为8C4、 8C6、 9D6.mAb腹水ELISA 效价在1:16 000～1:256 000之间;HI效价为1:512 ～1:256 000;对A/Swine/Guangdong/LM/2004的中和效价分别为:10-2.83、 10-6.4、 10-5.8.Western blot分析结果显示,3 株mAb只与H1亚型猪流感病毒HA蛋白反应.结论:HA蛋白特异性mAb的研制为H1抗原变异分析及H1亚型猪流感诊断方法的建立奠定了物质基础.