人单核细胞趋化因子-1基因重组卡介苗的构建与鉴定

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目的构建能自动分泌性表达单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的重组卡介苗。方法分别以卡介苗(BCG)和人MCP-1cDNA为模板,通过PCR扩增得到120bp的BCG Ag85B信号肽基因序列和300bp的MCP-1基因序列。将上述两片段基因序列插入大肠杆菌-卡介苗穿梭质粒pMV261,得到重组质粒pMV261-Ag85B-MCP-1。测序鉴定完毕后,用电穿孔法将该重组质粒导入BCG中,构建重组卡介苗rBCG MCP-1。分别应用PCR扩增和Western blot检测rBCG MCP-1中MCP-1的基因
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