【摘 要】
：
目的 以人类6种细胞系为研究对象,确定基因表达研究中最佳的校正因子.方法 收集用苯并芘、过氧化氢、紫外线对应处理的H1299、U251、HUVEC,同时以无任何处理的这3种细胞为对照组,上述细胞的融合率均为70％;并收集无任何处理、融合率分别为100％、70％的293T、HepG2、HeLa细胞.细胞计数后,向每种细胞系中加入其1/10数目的大鼠肝细胞,混合均匀后抽提总RNA、反转录合成cDNA第
【机 构】
：
200433上海,复旦大学国家遗传工程重点实验室&现代人类学教育部重点实验室,201203,上海天昊生物科技有限公司,200433上海,复旦大学国家遗传工程重点实验室&现代人类学教育部
论文部分内容阅读
目的 以人类6种细胞系为研究对象,确定基因表达研究中最佳的校正因子.方法 收集用苯并芘、过氧化氢、紫外线对应处理的H1299、U251、HUVEC,同时以无任何处理的这3种细胞为对照组,上述细胞的融合率均为70％;并收集无任何处理、融合率分别为100％、70％的293T、HepG2、HeLa细胞.细胞计数后,向每种细胞系中加入其1/10数目的大鼠肝细胞,混合均匀后抽提总RNA、反转录合成cDNA第一链、绝对定量PCR.借助大鼠肝细胞中Polr2a的表达量校正固有实验误差,分析比较不同分组间各校正因子间的表达稳定性.结果 定量数据经校正、分组分析后,得出变异系数最小的3种校正因子,分别为18SrRNA、总RNA、POLR2A.结论 POLR2A更适合被选作基因表达研究中的校正因子。
其他文献
葡萄膜炎是常见眼病，也是主要致盲原因之一。其发病机制复杂，目前尚未完全明确。内毒素诱导的葡萄膜炎动物模型，为了解葡萄膜炎的确切发病机制及开拓新的防治措施奠定了重要的实验基础。内毒素介导炎症性细胞的激活和组织损伤，Toll样受体4是内毒素脂多糖识别和细胞激活的初级信号受体，其信号转导通路的活化在内毒素诱导的葡萄膜炎发病中起关键作用，并最终导致相关炎症性细胞因子的活化及眼前节炎症病理反应。本文就内毒素
重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)是普外科病死率较高的急腹症之一."重症急性胰腺炎诊治指南"是目前国内公认的治疗SAP的最佳方案[1].针对属于手术适应证的SAP病人进行手术治疗是"指南"中的重要内容,可以有效降低该部分病人的病死率。
目的 比较piggyBac( PB)转座子和Tol2转座子介导基因整合到细胞基因组中并实现长期表达的能力,探索将转座子作为一种研究基因长期表达的工具.方法 采用荧光蛋白和分泌型碱性磷酸酶(secreted alkaline phosphatase,SEAP)作为报告基因,利用PB转座子和Tol2转座子在CHO细胞和HEK 293T细胞中进行细胞转染实验,在传代前和传代后的不同时间点持续监测报告基因
100余年来,围绕着重症急性胰腺炎是否应行手术治疗、手术时机及术式的选择等一直存在着诸多争议.随着对其发病机制及病程的深入了解,以及重症监护技术的进步,重症急性胰腺炎的诊治取得了长足的进步,病死率下降到10%～30%,并在个体化治疗方案的基础上,逐渐形成早期尽量行非手术治疗,后期针对继发感染行手术治疗的共识。
目的 观察探究组合型人工肾即血液透析联合血液灌流不同频次治疗对维持性血液透析患者钙磷代谢紊乱、甲状旁腺激素清除的临床效果.方法 选取我科2015年6月至2018年6月维持性
为探究吕家坨井田地质构造格局,根据钻孔勘探资料,采用分形理论和趋势面分析方法,研究了井田7
目的 探讨北京怀柔地区肾组织活检的病理类型特点.方法 回顾性分析2014年1月～ 2018年5月我中心经皮肾活检的200例肾脏病理资料,并进行统计分析和总结.结果 200例患者中男性113
目的 探讨白细胞介素-6、8、10与变应性鼻炎( allergic rhinitis,AR)发病的相关性,为指导临床治疗提供实验依据.方法 应用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测35例正常健康对照组以及60例变应性鼻炎患者脱敏治疗前后血清标本中IL-6、IL-8、IL-10的表达水平,并应用SPSS 13.0软件分析治疗前后各
病例报告rn宋某,男性,38岁,汉族,已婚,河北,农民.主因“夜尿增多11年,乏力、骨痛9年,规律血液透析8年余”于2018年6月12日入院.现病史:11年前患者无明显诱因出现夜尿增多,偶
目的 探讨肾素-血管紧张素系统中AGT基因M235T和ACE基因I/D多态性与过敏性紫癜和过敏性紫癜性肾炎易感性的关系.方法 应用PCR和PCR - RFLP技术检测145例过敏性紫癜/过敏性紫癜性肾炎患者与172例正常对照组血管紧张素原基因第2外显子M235T多态性及血管紧张素转换酶基因第16内含子I/D多态性.结果 ①AGT基因型构成比在HSP组、HSPN组与正常对照组之间差异有统计学意义(P