【摘 要】
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目的 探讨N6-甲基腺嘌呤（m6A）“识别蛋白”胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2（IGF2BP2）在肾透明细胞癌（ccRCC）中的潜在作用。方法 通过分析癌症基因数据库（TCGA）、采用qRT-PCR法和Western blotting法检测IGF2BP2在肾癌中的表达水平,甲基化RNA免疫沉淀qPCR结合生物信息学鉴定整合素α5（ITGA5）mRNA的m6A修饰。采用基因敲低/过表达技术,
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目的 探讨N6-甲基腺嘌呤（m6A）“识别蛋白”胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2（IGF2BP2）在肾透明细胞癌（ccRCC）中的潜在作用。方法 通过分析癌症基因数据库（TCGA）、采用qRT-PCR法和Western blotting法检测IGF2BP2在肾癌中的表达水平,甲基化RNA免疫沉淀qPCR结合生物信息学鉴定整合素α5（ITGA5）mRNA的m6A修饰。采用基因敲低/过表达技术,采用qRT-PCR和Western blotting法检测IGF2BP2对ITGA5表达调控的作用。通过功能性获得和缺失实验确定IGF2BP2和ITGA5对肾癌细胞增殖和迁移的调控。结果TCGA肾癌数据库显示,IGF2BP2在肾癌组织中高表达。同时高表达的IGF2BP2不利于患者的整体生存期（HR=1.6,P=0.005）和无病生存期（HR=1.9,P=0.014）。qRT-PCR法以及Western blotting法检测结果显示,IGF2BP2在肾癌组织中高表达。Western blotting检测结果显示,正常肾上皮细胞中IGF2BP2的表达低于其他几种肾癌细胞系。基因集合富集分析（GSEA）发现ITGA5可能是IGF2BP2下游靶分子。进一步通过敲除或者过表达发现,IGF2BP2在转录后水平调控ITGA5。甲基化RNA免疫沉淀qPCR发现ITGA5在3’UTR区存在m6A修饰化位点,低m6A修饰可能有助于维持其mRNA的稳定性。结论 IGF2BP2在肾透明细胞癌中高表达;IGF2BP2不利于肾癌患者的生存预后;IGF2BP2/m6A/ITGA5信号轴调控肾癌细胞的增殖、迁移和血管新生。
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