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目的
研究利用自噬促进剂雷帕霉素和抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methlyadenine, 3-MA)或渥曼青霉素调控内皮祖细胞(endothelial progenitor cells, EPCs)自噬，观察对其迁移、成血管和分泌能力的影响以及微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain3-Ⅱ，LC3-Ⅱ)、溶酶体相关膜蛋白2A(lysosome-associated membrane proteintype 2A, LAMP2A)和热休克蛋白70( heat shock protein 70, HSC70)的水平变化。
方法密度梯度离心法分离SD大鼠的骨髓单个核细胞，EGM-2MV培养基诱导、培养、扩增骨髓源性EPCs。分为四组，即雷帕霉素组，3-MA组，渥曼青霉素组和对照组，分别用10 μg/L雷帕霉素，5 mmol/L 3-MA，50 nmol/L渥曼青霉素处理EPCs 12 h，对照组加入等量培养基。分别用transwell实验及成血管实验检测EPCs迁移和成血管能力，ELISA检测细胞因子水平。Western blotting检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、LAMP2A和HSC70水平。
结果(1)10 μg/L雷帕霉素抑制EPCs的迁移、成血管和分泌功能；而5 mmol/L 3-MA和50 nmol/L渥曼青霉素促进EPCs功能。(2)Western blotting显示，雷帕霉素组EPCs LC3-Ⅱ表达水平高于对照组，而LAMP2A和HSC70表达水平低于对照组；3-MA组和渥曼青霉素组则相反。
结论适度抑制EPCs自噬可促进其增殖、迁移、成血管和分泌能力，其分子机制可能为下调自噬相关蛋白LC3-Ⅱ水平。