短穗鱼尾葵花粉泛过敏原profilin基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定

来源 :热带医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：cs80085829

【摘要】

：

目的克隆并表达短穗鱼尾葵花粉中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白（profilin）。方法利用RT-PCR结合RACE技术克隆短穗鱼尾葵花粉中泛变应原profilin的全长基因,并进行序列分析。然后设

【作者】

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刘晓宇邬玉兰刘志刚孟光张红云

【机构】

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深圳大学过敏反应与免疫学研究所,海南省海口市人民医院耳鼻咽喉科

【出处】

：

热带医学杂志

【发表日期】

：

2007年7期

【关键词】

：

短穗鱼尾葵花粉 PROFILIN 基因表达纯化 Caryota mitis pollen profilin cloning expression

【基金项目】

：

国家自然科学基金（No.30070702）,广东省自然科学基金（No.020738）,广东省科技重点专项（No.2003A3080502）,深圳市科技计划项目（No.200326）.

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目的克隆并表达短穗鱼尾葵花粉中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白（profilin）。方法利用RT-PCR结合RACE技术克隆短穗鱼尾葵花粉中泛变应原profilin的全长基因,并进行序列分析。然后设计带有酶切位点的特异性引物,采用RT-PCR获得整个短穗鱼尾葵花粉profilin的开放阅读框,将其与pET28a载体连接并转化大肠杆菌BL21（DE3）进行诱导表达,通过Ni2＋亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,采用Western-blot检测其IgE结合活性。结果克隆获得了短穗鱼尾葵花粉profilin的全长基因,由6

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