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NF-κB p65亚基DNA结合域相互作用多肽的筛选及功能鉴定

来源 :免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wzcc1125

【摘 要】

：

目的以NF-κB p65亚基DNA结合域为诱饵蛋白，筛选能够与其发生相互作用的多肽，并鉴定这些多肽对NF-κB DNA结合活性的抑制效应。方法首先利用PCR搭桥扩增方法获取NF-κB p65亚基

【作 者】

：

徐祥 梁华平 刘昕 李生茂 史海水 刘东擘 吴强 王正国 

【机 构】

：

第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室

【出 处】

：

免疫学杂志

【发表日期】

：

2006年2期

【关键词】

：

NF-ΚB P65 酵母双杂交系统 随机多肽库 NF-κB  p65  Yeast two-hybrid system  Random peptide libr 

【基金项目】

：

国家重点基础研究发展规划（G1999054203）,国家自然科学基金（30080009,30200270）和全军“十五”课题基金项目（2001-2005）资助

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目的以NF-κB p65亚基DNA结合域为诱饵蛋白，筛选能够与其发生相互作用的多肽，并鉴定这些多肽对NF-κB DNA结合活性的抑制效应。方法首先利用PCR搭桥扩增方法获取NF-κB p65亚基DNA结合域的基因片段，后将其克隆到酵母双杂交pGBKT7 DNA-BD载体上，与GAL4 DNA-BD融合，形成GAL4 DNA-BD／p65BD融合蛋白；再以GAL4 DNA-BD／p65BD融合蛋白为诱饵蛋白行酵母双杂交实验，自16肽随机肽库中筛选与NF-κB p65亚基DNA结合域相互作用的多肽；最后选择性

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