【摘 要】
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目的:制备过表达GDNF的转基因STO细胞,用于富集精原干细胞。方法:构建GDNF、EGFP双顺反子表达载体,采用XhoⅠ、SspⅠ酶切法鉴定重组质粒,用脂质体介导法将质粒转入STO细胞,经
【机 构】
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包头医学院第一附属医院,包头医学院基础医学与法医学院
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目的:制备过表达GDNF的转基因STO细胞,用于富集精原干细胞。方法:构建GDNF、EGFP双顺反子表达载体,采用XhoⅠ、SspⅠ酶切法鉴定重组质粒,用脂质体介导法将质粒转入STO细胞,经G418抗性筛选后,分离扩增培养表达绿色荧光蛋白的抗性细胞,采用PCR法鉴定转基因细胞。结果:成功构建重组GDNF表达载体,将其转染STO细胞后,能够稳定整合到细胞染色体中,获得了表达绿色荧光蛋白的转GDNF基因STO细胞。结论:通过构建表达载体,制备GDNF转基因STO细胞,为富集精原干细胞的研究奠定了基础。
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