【摘 要】
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利用RT-PCR从人胎盘组织中获取BMP-6成熟肽的cDNA 片段,并克隆到表达载体pET-15b中, 构建hBMP-6成熟肽的非融合蛋白表达质粒pET-BMP6,转化E.coli BL21(DE3).IPTG 诱导4h后,工
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利用RT-PCR从人胎盘组织中获取BMP-6成熟肽的cDNA 片段,并克隆到表达载体pET-15b中, 构建hBMP-6成熟肽的非融合蛋白表达质粒pET-BMP6,转化E.coli BL21(DE3).IPTG 诱导4h后,工程菌高表达rhBMP-6成熟肽,在SDS-PAGE上出现预期的新蛋白带(≈15kD), 约占菌体总蛋白的10%,表达产物以包涵体形式存在.分离和纯化的包涵体溶解于8 mol/L尿素,在变性溶解状态下经阳离子交换层析,得到目的蛋白纯度达95%以上.再经稀释复性后,约80%的rhBMP-
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