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根据蓝舌病病毒8型(BTV-8)VP2基因序列(Seg-2)设计特异性引物和探针,建立了BTV-8实时荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)检测方法.结果表明该法特异性强,能准确检测BTV-8核酸,与蓝舌病病毒其他血清型病毒、鹿流行性出血热病毒(EHDV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、口蹄疫病毒(FMDV)等病原核酸无交叉反应;最低可检测核酸浓度为2.8×103 copies/mL;Ct值组内和组间变异系数(CV)均小于2％.用所建立方法对115份临床样品进行检测,结果均为阴性,与文献报道的方法检测结果一致.建立的RT-qPCR方法可用于BTV-8的临床检测和流行病学调查.