论文部分内容阅读
目的 探讨自噬对放射性碘 １２５标记抗 Ｔｏｌｌ样受体 ５（１２５Ｉ-ａｎｔｉ-ＴＬＲ５）靶向同种移植排斥显像的影响及特点。方法 建立小鼠皮肤同种移植模型，分为对照组（无药物处理）、雷帕霉素组、３-甲基腺嘌呤（３ＭＡ）组和联合组（雷帕霉素 ＋３ＭＡ处理）。采用 Ｉｏｄｏｇｅｎ法常规制备１２５Ｉ-ａｎｔｉ-ＴＬＲ５，测定其在生理盐水和血清中的稳定性；体外根据浓度不同将细胞分为对照组、雷帕霉素组（１０ｎｇ／ｍＬ）、３ＭＡ组（１０ｍｍｏｌ／Ｌ）和联合组（１０ｎｇ／ｍＬ雷帕霉素 ＋１０ｍｍｏｌ／Ｌ３ＭＡ），研究１２５Ｉ-ａｎｔｉ-ＴＬＲ５与处理细胞的结合与解离；在移植后 ９ｄ，在小鼠同种皮肤移植模型尾静脉注射１２５Ｉ-ａｎｔｉ-ＴＬＲ５，７２ｈ后进行生物学分布研究，２４、４８、７２ｈ进行全身磷屏自显影显像，分析 Ｔ／ＮＴ比值（靶与非靶比值）；采用病理及免疫组化染色法分析移植皮片 Ｂｅｃｌｉｎ１／ＴＬＲ５的表达。结果 １２５Ｉ-ａｎｔｉ-ＴＬＲ５标记率高，稳定性好。与雷帕霉素组相比，联合组细胞与１２５Ｉ-ａｎｔｉ-ＴＬＲ５结合率与解离率无明显改变。注射１２５Ｉ-ａｎｔｉ-ＴＬＲ５后 ７２ｈ，标记物主要经肝肾代谢。移植皮片放射性浓聚，雷帕霉素组和联合组 Ｔ／ＮＴ比值显著高于对照组（Ｐ＜０．００１，Ｐ＜０．００１）。全身动态磷屏放射自显影显像显示，各组 ４８ｈ移植皮片即可显像，其中雷帕霉素组移植皮片放射性浓聚最明显（Ｐ＜０．００１）；雷帕霉素组和联合组 ７２ｈ显像明显，放射性活度比均显著高于对照组（Ｐ＜０．００１）。移植后１２ｄ对照组移植皮片炎症细胞浸润明显，而雷帕霉素组与联合组炎性浸润减少；对照组及雷帕霉素组自噬分子Ｂｅｃｌｉｎ１表达增高，而联合组无明显降低；雷帕霉素组及联合组 ＴＬＲ５表达无显著变化。结论 自噬抑制对雷帕霉素作用下 ＴＬＲ５表达及１２５Ｉ-ａｎｔｉ-ＴＬＲ５靶向同种移植排斥显像无明显影响，１２５Ｉ-ａｎｔｉ-ＴＬＲ５可用于免疫耐受状态下同种移植排斥显像。