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摘要：为比较不同剂量艾叶水煮醇提液对肉兔生长性能的影响，采用24只断奶质量相当的哈尔滨白兔，研究不同剂量艾叶水煮醇提液对肉兔采食量、日增质量、料肉比等生长性能的影响。为探讨其作用机理测定了每只肉兔免疫球蛋白IgG的含量，并比较各组肉兔空肠绒毛形态特征。与对照组相比，剂量为3.0 mL/只的末质量、平均日增质量、料肉比差异均极显著（P<0.05），空肠绒毛高度差异显著（P
关键词：艾叶；水煮醇提液；肉兔；生长性能；免疫球蛋白
中图分类号： S816.73 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2016）07-0295-03
艾草是菊科多年生草本植物，普遍生长于路旁、荒野、草地，易采集且价格低廉。艾叶是传统中药，其味辛温，归肝、脾、胃三经，具有理气血、逐寒湿、调经、安胎、止血、防治多种疾病等功能[1]。现代医学分析和开发研究表明，艾叶具有抗菌、抗病毒[2]、抗肿瘤[3-4]、抗炎、抗氧化[5]等药理活性。艾叶不仅是人类的常用中药，也是畜禽及水生动物良好的饲料和饲料添加剂，具有促进动物生长、提高生产性能、改善动物产品品质、防治疾病等作用。艾叶富含营养成分，粗脂肪含量4.4%、粗纤维含量19.3%、粗灰分含量7.4%、粗蛋白质含量13.6%[6]。氨基酸的组成比较全面，谷氨酸、赖氨酸、组氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、香鲜味氨酸占总氨基酸的75%～90%[7]。在蛋雏鸡日粮中添加适量大蒜和艾叶可提高鸡的质量、日增质量，并降低料肉比，在添加之初对蛋雏鸡的质量和日增质量没有明显影响，之后影响逐渐增大[8]。在蛋种鸡的基础日粮中添加艾叶粉，可提高产蛋率、种蛋受精率、受精蛋孵化率、受精蛋健雏率[9]。艾叶在肉兔中的应用报道较少，仅限于粉剂在饲料中直接添加。本试验研究艾叶水煮醇提液对肉兔生长性能的影响，并探讨其作用机理，为中药添加剂的现代化应用提供依据。
1 材料与方法
1.1 试验动物
选取健康的30日龄断奶哈尔滨白兔，雌雄各半，质量为（0.50±0.05） kg。1.2 主要试剂和药品
艾叶购自安徽亿源中药饮片科技有限公司，批号20140901。兔免疫球蛋白G（IgG）、ELISA检测试剂盒购自上海雅浦生物科技有限公司，批号2014/11（96T）。
1.3 主要仪器
VARIOSKAN FLASH型全自动多功能酶标仪（美国热电公司），RE-52AA型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂），RM2015型轮转式切片机（上海莱卡有限公司）。
1.4 艾叶水煮醇提液的制备
100 g艾叶经蒸馏水浸泡30 min后，分别用10、8、6倍量的蒸馏水煮3次，同时收集蒸馏液备用，将3次的水煎液混合，用4层纱布过滤，浓缩至100 mL。冷却后醇提2次并调节pH值、过滤，加10 mL蒸馏成分，用蒸馏水稀释至100 mL，使含药量为1 g/mL。
1.5 生长性能试验
将24只肉兔随机分为A、B、C、D组，每组6只，公母各半。A、B、C组分别为艾叶水煮醇提液的高剂量组（4.0 mL/只）、中剂量组（3.0 mL/只）、低劑量组（2.0 mL/只），D组为对照组。A组每只每天通过灌胃方式直接灌服4.0 mL艾叶水煮醇提液，B组灌服3.0 mL艾叶水煮醇提液和1.0 mL生理盐水，C组灌服2.0 mL艾叶水煮醇提液和2.0 mL生理盐水，D组灌服4.0 mL生理盐水。试验期间使用配合饲料饲喂，笼养，每笼6只，每天定时加料2次，自由采食、饮水，每天傍晚定时给药，连续30 d。试验期内固定专人记录试验数据，观察采食情况。每天定时记录兔的质量和耗料量。试验结束后，分别计算兔的平均日增质量、料肉比等。
1.6 免疫球蛋白检测
分别在给药前（0 d）以及给药后10、20、30 d的傍晚，每只兔心脏采血2 mL，静置后以3 000 r/min离心5 min，取血清分别进行兔免疫球蛋白G（IgG）ELISA检测。采用间接ELISA抗体检测法，向预先包被兔免疫球蛋白G捕获抗体的包被微孔中依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，进行温育并彻底洗涤。采用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色，并在酸的作用下转化为最终的黄色，颜色深浅与兔免疫球蛋白浓度呈正相关。采用酶标仪在 450 nm 波长下测定吸光度，通过分光光度计测出D值，从而得到免疫球蛋白浓度。
1.7 空肠绒毛高度和隐窝深度测定
试验结束，肉兔屠宰后迅速剖开腹腔，在生理盐水中每只肉兔取一段空肠肠管，采用常规方法制作石蜡组织切片。从组织切片中选取完整、伸展良好的绒毛和隐窝各5个，分别在显微镜下测定绒毛高度和隐窝深度，并计算其比值。
1.8 数据分析
采用SPSS 18.0软件对试验数据进行方差分析，并对各组试验数据的差异显著性进行统计分析。
2 结果与分析
2.1 对肉兔生长性能的影响
肉兔的生长性能情况见表1。
由表1可知，A、B、C组的平均日增质量分别比D组提高11.51%、13.96%、4.90%。A组与D组差异显著（P<005），B组与D组差异极显著（P0.05）。结果显示，3.0 mL/只对提高日增质量的效果最好。A组的料肉比为3.59 ∶ 1，B组的料肉比为325 ∶ 1，C组的料肉比为3.29 ∶ 1，D组的料肉比为 3.64 ∶ 1。可见，肉兔每增质量1 kg，A组比D组节省饲料 0.046 kg，B组、C组分别可节省0.38、0.34 kg。A、B、C试验组分别比D组降低1.27%、10.55%、9.33%。结果显示，3.0 mL/只 的药量对降低料肉比的效果最好。
2.2 兔免疫球蛋白G（IgG）ELISA检测 兔免疫球蛋白G（IgG）ELISA检测结果见表2。用药 30 d 后，A、B、C组的免疫球蛋白水平分别提高114.25%、167.59%、149.68%，而D组（对照组）的免疫球蛋白水平提高113.08%。与对照组相比，B组用药10、20、30 d时差异显著（P
2.3 空肠绒毛高度（VH）和隐窝深度（CD）
各组肉兔的空肠绒毛高度和隐窝深度测定结果见表3。
由表3可知，与对照组相比，3 mL/只浓度的空肠绒毛高度和隐窝深度差异极显著（P
3 结论与讨论
3.1 对生长性能的影响
黄贺儒研究发现，试验组在基础日粮中用艾叶粉替代20%稻谷糠，对照组饲喂基础日粮，试验组肉用兔的日增质量比对照组提高14.40%（P<0.01），饲料报酬提高11.10%（P0.05）。随着艾叶水煮醇提液给药量的增加，其对生长性能的提高呈正态分布，而不是线性分布。孙蓉等研究表明，艾叶可发挥镇痛作用，与降低血中PGE水平、调节体内SOD及NO水平有关，但其发挥药效作用的同时伴随有肝毒副作用[10]。艾叶功效的发挥与毒性的表达、剂量、用药时间密切相关[11]；因此，使用艾叶时必须严格控制剂量。
3.2 对免疫球蛋白的影响
孔祥峰等进行了9种中药提取物对雏鸡新城疫抗体水平影响的研究，发现中草药免疫增强剂对机体的细胞免疫和体液免疫功能具有增强或调节作用，可提高机体的抗病力和抵抗力，减少疾病的发生，进而促进生长[12]。李慧峰等研究表明，秦皮、黄连等具有提高机体免疫力的作用，可促进免疫细胞生长[13]。本试验中，用药30 d后A、B、C组的免疫球蛋白水平分别提高114.25%、167.59%、149.68%，而D组（对照组）提高113.08%。可见，艾叶水煮醇提液可提高肉兔的免疫球蛋白水平，进而提高机体抵抗力，减少疾病的发生，提高肉兔的生长性能。
3.3 对空肠绒毛高度和隐窝深度的影响
小肠是消化吸收的重要场所，小肠绒毛高度的增加有助于提高动物机体的消化吸收能力[14]。小肠绒毛高度与隐窝深度的比值是衡量小肠上皮细胞更新速度、小肠消化吸收能力的重要指标[15]。本试验中，剂量为3.0 mL/只的B组与对照组相比差异极显著，表明艾叶水煮醇提液可提高肉兔小腸绒毛高度和小肠上皮细胞的更新速度，有助于提高其消化吸收能力，从而提高家兔的生长性能。
参考文献：
[1]汪国华，张文惠，崔 峻. 艾叶研究近况[J]. 江西中医学院学报，1998，10（4）：192-193.
[2]Wang W，Zhang X K，Wu N，et al. Antinicrobial activities of essential oil from Artemisia argyi leaves[J]. Journal of Forestry Research，2006，17（4）：332-334.
[3]Lee H G，Yu K A，Oh W K，et al. Inhibitory effect of jaceosidin isolated from Artemisia argyi on the function of E6 and E7 oncoproteins of HPV 16[J]. Journal of Ethnopharmacology，2005，98（3）：339-343.
[4]Shoem A，Hamilton B，Dairkee S H，et al. In vitro anticancer activity of twelve Chinese Med icinal herbs[J]. Phytotherapy Research，2005，19（7）：649-651.
[5]Kim M J，Kim D H，Lee K W，et al. Jaceosidin induces apoptosis in ras-transformed human breast epithelial cells through generation of reactive oxygen species[J]. Annals of the New York Academy of Sciences，2007，1095：483-495.
[6]黄贺儒. 艾叶粉代替稻谷糠饲喂肉用兔的试验效果[J]. 广西畜牧兽医，2003，19（1）：9-10.
[7]王艳荣，何 云，苗志国，等. “绿色”饲料添加剂——艾叶的研究进展[J]. 粮食与饲料工业，2009（10）：38-40.
[8]赵兴华，何 欣，刘廷玉. 大蒜和艾叶对蛋雏鸡生长性能和免疫功能的影响[J]. 黑龙江畜牧兽医，2011（15）：75-77.
[9]杜森有. 种鸡饲料中添加艾叶粉对蛋质量的影响[J]. 饲料研究，2008（2）：50-51.
[10]孙 蓉，冯 群，黄 伟，等. 基于镇痛作用的艾叶不同组分药效与毒副作用机制研究[J]. 中药药理与临床，2013，29（6）：76-80.
[11]王惠君，王文泉，卢 诚，等. 艾叶研究进展概述[J]. 江苏农业科学，2015，43（8）：15-19，44.
[12]孔祥峰，胡元亮，李祥瑞，等. 9种中药成分对新城疫Ⅳ系疫苗免疫雏鸡血清中血凝抑制抗体水平的影响[J]. 畜牧兽医学报，2004，35（4）：468-472.
[13]李慧峰，单明辉，李子平. 复方中药免疫增强剂的初步筛选及其毒性作用研究[J]. 安徽农业科学，2012，40（31）：15297-15298.
[14]顾宪红，张宏福，佘锐萍，等. 断奶日龄对仔猪肠黏膜形态的影响[J]. 畜牧兽医学报，2001，32（4）：306-313.
[15]晁洪雨，李福昌. 日粮ADF水平对肉兔氮代谢、小肠组织学结构和二糖酶活性的影响[J]. 中国兽医学报，2008，28（5）：604-607.
关键词：艾叶；水煮醇提液；肉兔；生长性能；免疫球蛋白
中图分类号： S816.73 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2016）07-0295-03
艾草是菊科多年生草本植物，普遍生长于路旁、荒野、草地，易采集且价格低廉。艾叶是传统中药，其味辛温，归肝、脾、胃三经，具有理气血、逐寒湿、调经、安胎、止血、防治多种疾病等功能[1]。现代医学分析和开发研究表明，艾叶具有抗菌、抗病毒[2]、抗肿瘤[3-4]、抗炎、抗氧化[5]等药理活性。艾叶不仅是人类的常用中药，也是畜禽及水生动物良好的饲料和饲料添加剂，具有促进动物生长、提高生产性能、改善动物产品品质、防治疾病等作用。艾叶富含营养成分，粗脂肪含量4.4%、粗纤维含量19.3%、粗灰分含量7.4%、粗蛋白质含量13.6%[6]。氨基酸的组成比较全面，谷氨酸、赖氨酸、组氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、香鲜味氨酸占总氨基酸的75%～90%[7]。在蛋雏鸡日粮中添加适量大蒜和艾叶可提高鸡的质量、日增质量，并降低料肉比，在添加之初对蛋雏鸡的质量和日增质量没有明显影响，之后影响逐渐增大[8]。在蛋种鸡的基础日粮中添加艾叶粉，可提高产蛋率、种蛋受精率、受精蛋孵化率、受精蛋健雏率[9]。艾叶在肉兔中的应用报道较少，仅限于粉剂在饲料中直接添加。本试验研究艾叶水煮醇提液对肉兔生长性能的影响，并探讨其作用机理，为中药添加剂的现代化应用提供依据。
1 材料与方法
1.1 试验动物
选取健康的30日龄断奶哈尔滨白兔，雌雄各半，质量为（0.50±0.05） kg。1.2 主要试剂和药品
艾叶购自安徽亿源中药饮片科技有限公司，批号20140901。兔免疫球蛋白G（IgG）、ELISA检测试剂盒购自上海雅浦生物科技有限公司，批号2014/11（96T）。
1.3 主要仪器
VARIOSKAN FLASH型全自动多功能酶标仪（美国热电公司），RE-52AA型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂），RM2015型轮转式切片机（上海莱卡有限公司）。
1.4 艾叶水煮醇提液的制备
100 g艾叶经蒸馏水浸泡30 min后，分别用10、8、6倍量的蒸馏水煮3次，同时收集蒸馏液备用，将3次的水煎液混合，用4层纱布过滤，浓缩至100 mL。冷却后醇提2次并调节pH值、过滤，加10 mL蒸馏成分，用蒸馏水稀释至100 mL，使含药量为1 g/mL。
1.5 生长性能试验
将24只肉兔随机分为A、B、C、D组，每组6只，公母各半。A、B、C组分别为艾叶水煮醇提液的高剂量组（4.0 mL/只）、中剂量组（3.0 mL/只）、低劑量组（2.0 mL/只），D组为对照组。A组每只每天通过灌胃方式直接灌服4.0 mL艾叶水煮醇提液，B组灌服3.0 mL艾叶水煮醇提液和1.0 mL生理盐水，C组灌服2.0 mL艾叶水煮醇提液和2.0 mL生理盐水，D组灌服4.0 mL生理盐水。试验期间使用配合饲料饲喂，笼养，每笼6只，每天定时加料2次，自由采食、饮水，每天傍晚定时给药，连续30 d。试验期内固定专人记录试验数据，观察采食情况。每天定时记录兔的质量和耗料量。试验结束后，分别计算兔的平均日增质量、料肉比等。
1.6 免疫球蛋白检测
分别在给药前（0 d）以及给药后10、20、30 d的傍晚，每只兔心脏采血2 mL，静置后以3 000 r/min离心5 min，取血清分别进行兔免疫球蛋白G（IgG）ELISA检测。采用间接ELISA抗体检测法，向预先包被兔免疫球蛋白G捕获抗体的包被微孔中依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，进行温育并彻底洗涤。采用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色，并在酸的作用下转化为最终的黄色，颜色深浅与兔免疫球蛋白浓度呈正相关。采用酶标仪在 450 nm 波长下测定吸光度，通过分光光度计测出D值，从而得到免疫球蛋白浓度。
1.7 空肠绒毛高度和隐窝深度测定
试验结束，肉兔屠宰后迅速剖开腹腔，在生理盐水中每只肉兔取一段空肠肠管，采用常规方法制作石蜡组织切片。从组织切片中选取完整、伸展良好的绒毛和隐窝各5个，分别在显微镜下测定绒毛高度和隐窝深度，并计算其比值。
1.8 数据分析
采用SPSS 18.0软件对试验数据进行方差分析，并对各组试验数据的差异显著性进行统计分析。
2 结果与分析
2.1 对肉兔生长性能的影响
肉兔的生长性能情况见表1。
由表1可知，A、B、C组的平均日增质量分别比D组提高11.51%、13.96%、4.90%。A组与D组差异显著（P<005），B组与D组差异极显著（P0.05）。结果显示，3.0 mL/只对提高日增质量的效果最好。A组的料肉比为3.59 ∶ 1，B组的料肉比为325 ∶ 1，C组的料肉比为3.29 ∶ 1，D组的料肉比为 3.64 ∶ 1。可见，肉兔每增质量1 kg，A组比D组节省饲料 0.046 kg，B组、C组分别可节省0.38、0.34 kg。A、B、C试验组分别比D组降低1.27%、10.55%、9.33%。结果显示，3.0 mL/只 的药量对降低料肉比的效果最好。
2.2 兔免疫球蛋白G（IgG）ELISA检测 兔免疫球蛋白G（IgG）ELISA检测结果见表2。用药 30 d 后，A、B、C组的免疫球蛋白水平分别提高114.25%、167.59%、149.68%，而D组（对照组）的免疫球蛋白水平提高113.08%。与对照组相比，B组用药10、20、30 d时差异显著（P
2.3 空肠绒毛高度（VH）和隐窝深度（CD）
各组肉兔的空肠绒毛高度和隐窝深度测定结果见表3。
由表3可知，与对照组相比，3 mL/只浓度的空肠绒毛高度和隐窝深度差异极显著（P
3 结论与讨论
3.1 对生长性能的影响
黄贺儒研究发现，试验组在基础日粮中用艾叶粉替代20%稻谷糠，对照组饲喂基础日粮，试验组肉用兔的日增质量比对照组提高14.40%（P<0.01），饲料报酬提高11.10%（P0.05）。随着艾叶水煮醇提液给药量的增加，其对生长性能的提高呈正态分布，而不是线性分布。孙蓉等研究表明，艾叶可发挥镇痛作用，与降低血中PGE水平、调节体内SOD及NO水平有关，但其发挥药效作用的同时伴随有肝毒副作用[10]。艾叶功效的发挥与毒性的表达、剂量、用药时间密切相关[11]；因此，使用艾叶时必须严格控制剂量。
3.2 对免疫球蛋白的影响
孔祥峰等进行了9种中药提取物对雏鸡新城疫抗体水平影响的研究，发现中草药免疫增强剂对机体的细胞免疫和体液免疫功能具有增强或调节作用，可提高机体的抗病力和抵抗力，减少疾病的发生，进而促进生长[12]。李慧峰等研究表明，秦皮、黄连等具有提高机体免疫力的作用，可促进免疫细胞生长[13]。本试验中，用药30 d后A、B、C组的免疫球蛋白水平分别提高114.25%、167.59%、149.68%，而D组（对照组）提高113.08%。可见，艾叶水煮醇提液可提高肉兔的免疫球蛋白水平，进而提高机体抵抗力，减少疾病的发生，提高肉兔的生长性能。
3.3 对空肠绒毛高度和隐窝深度的影响
小肠是消化吸收的重要场所，小肠绒毛高度的增加有助于提高动物机体的消化吸收能力[14]。小肠绒毛高度与隐窝深度的比值是衡量小肠上皮细胞更新速度、小肠消化吸收能力的重要指标[15]。本试验中，剂量为3.0 mL/只的B组与对照组相比差异极显著，表明艾叶水煮醇提液可提高肉兔小腸绒毛高度和小肠上皮细胞的更新速度，有助于提高其消化吸收能力，从而提高家兔的生长性能。
参考文献：
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[9]杜森有. 种鸡饲料中添加艾叶粉对蛋质量的影响[J]. 饲料研究，2008（2）：50-51.
[10]孙 蓉，冯 群，黄 伟，等. 基于镇痛作用的艾叶不同组分药效与毒副作用机制研究[J]. 中药药理与临床，2013，29（6）：76-80.
[11]王惠君，王文泉，卢 诚，等. 艾叶研究进展概述[J]. 江苏农业科学，2015，43（8）：15-19，44.
[12]孔祥峰，胡元亮，李祥瑞，等. 9种中药成分对新城疫Ⅳ系疫苗免疫雏鸡血清中血凝抑制抗体水平的影响[J]. 畜牧兽医学报，2004，35（4）：468-472.
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[14]顾宪红，张宏福，佘锐萍，等. 断奶日龄对仔猪肠黏膜形态的影响[J]. 畜牧兽医学报，2001，32（4）：306-313.
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