目的建立一种新的体外胰腺癌神经浸润（PNI）研究模型，并观察PNI过程中神经突的生长状况，以及胰腺癌细胞的增殖、凋亡和迁移情况。方法取人胰腺癌细胞系MIAPaCa-2和大鼠背根神经节（DRG），于Matrigel胶中共培养，建立研究模型。倒置显微镜下观察胰腺癌细胞集落形成和DRG神经突生长情况以及胰腺癌细胞的迁移情况，并用Image．ProPlus5．0图像分析软件进行图像分析，计算神经突和胰腺癌细胞集落所占的面积。免疫细胞化学法检测胰腺癌细胞增殖细胞核抗原Ki-67的表达情况，计算胰腺癌细胞增殖指数，四甲基偶氮唑蓝（Mrrr）法检测胰腺癌细胞的增殖情况。利用流式细胞仪检测胰腺癌细胞的凋亡率。结果共培养24和72h，MIAPaCa-2／DRG共培养组的细胞集落面积分别为176．67±5．57和242．83±4．92，明显大于MIAPaCa-2细胞单独培养组（分别为151．17±5．98和182．50±5．39，均P〈0．01）；MIAPaCa-2／DRG共培养组的神经突面积分别为129．33±2．73和202．50±8．04，明显大于DRG单独培养组（分别为63．674-5．17和78．674-3．61，均P〈0．01）。神经突有明显向胰腺癌细胞集落方向生长的趋势，而神经突与胰腺癌细胞集落接触后，胰腺癌细胞则沿神经突生长的方向逆向迁移，最终到达DRG周围，出现类似PNI的表现。MTY与免疫细胞化学实验结果均表明，上清液培养组胰腺癌细胞的增殖远比普通培养基培养组活跃。流式细胞仪检测结果表明，上清液培养组胰腺癌细胞凋亡率为2．46％，明显低于普通培养基培养组（4．89％，P〈0．01）。结论MIAPaCa-2／DRG共培养模型成功构建，有助于胰腺癌PNI的研究。神经细胞与胰腺癌细胞的相互作用在胰腺癌的PNI过程中发挥重要作用。神经细胞与胰腺癌细胞可以相互促进对方的生长，并且胰腺癌细胞有沿神经突生长的方向逆向迁移的趋势。
人胰腺癌细胞系与大鼠背根神经节体外共培养的研究
【摘 要】
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目的建立一种新的体外胰腺癌神经浸润（PNI）研究模型，并观察PNI过程中神经突的生长状况，以及胰腺癌细胞的增殖、凋亡和迁移情况。方法取人胰腺癌细胞系MIAPaCa-2和大鼠背根神经节（DRG），于Matrigel胶中共培养，建立研究模型。倒置显微镜下观察胰腺癌细胞集落形成和DRG神经突生长情况以及胰腺癌细胞的迁移情况，并用Image．ProPlus5．0图像分析软件进行图像分析，计算神经突和胰腺癌
【机 构】
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青岛大学医学院附属海慈医院普外科,266033,青岛大学医学院附属海慈医院普外科,266033,天津医科大学肿瘤医院肝胆科,青岛大学医学院附属海慈医院普外科,266033,天津医科大学肿瘤医院肝胆科
【发表日期】
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2012年34期
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