HMGB1-siRNA对卵巢癌细胞OV5生物学活性影响研究

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目的探讨高迁移率簇蛋白B1(high mobiligy group box-1,HMGB1)RNA干扰对人卵巢癌细胞株OV5生物学活性的影响。方法合成siRNA序列,构建HMGB1基因的慢病毒shRNA载体,转染卵巢癌OV5细胞。实验分为HMGB1-siRNA-1组、HMGB1-siRNA-2组、HMGB1-siRNA-3组、阴性对照组和空白组。采用Real-time RT-PCR和蛋白质印迹法等方法检测RNA干扰对HMGB1表达的影响;MTT法绘制生长曲线,检测细胞凋亡;Transwell小室检测卵巢癌细胞侵袭能力的变化。结果 HMGB1-siRNA-1组、HMGB1-siRNA-2组和HMGB1-siRNA-3组细胞中,HMGB1mRNA的表达量分别为1.261±0.131、1.109±0.074和0.483±0.059,明显低于阴性对照组的2.331±0.192和空白对照组的2.164±0.177,差异有统计学意义,P=0.005。实验组癌细胞生长明显受到抑制,与对照组相比,差异有统计学意义,P=0.007。HMGB1表达下调明显增加癌细胞的凋亡,HMGB1-siRNA-3组的凋亡率(16.89±1.13)%,明显高于阴性对照组的(5.87±0.47)%和空白对照组的(4.51±0.48)%,差异有统计学意义,P<0.01。Transwell小室法检测细胞侵袭力显示,HMGB1-siRNA-3组穿膜细胞数明显减少,与阴性对照组和空白组比较,差异有统计学意义,P<0.05。结论 HMGB1特异性siRNA序列可显著下调HMGB1的表达,抑制OV5细胞的增殖,促进细胞凋亡,也可明显降低OV5细胞的侵袭能力,HMGB1可能成为卵巢癌治疗的一个潜在靶点。
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