【摘 要】
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目的对HBV DNA疫苗工程菌的发酵工艺进行优化。方法首先通过摇瓶培养确定基础培养基组成,提高单位菌量的质粒表达量。其次,在40 l发酵阶段,通过溶氧反馈调节的补料方式产生生
【基金项目】
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广东省2012年重大科技专项(重要新药创制)计划项目(2012A080204009)
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目的对HBV DNA疫苗工程菌的发酵工艺进行优化。方法首先通过摇瓶培养确定基础培养基组成,提高单位菌量的质粒表达量。其次,在40 l发酵阶段,通过溶氧反馈调节的补料方式产生生长限制效应,进一步获得高拷贝表达质粒的菌体。结果培养基优化后的工程菌DH5α/pS2S发酵最终可获得质粒304.99mg/l,质粒含量可达到2.40mg/g湿菌,超螺旋质粒DNA的比例达95%以上。结论已建立了在单位体积和单位菌量内高表达质粒HBV DNA疫苗工程菌的发酵工艺,为HBV DNA疫苗的工业规模化生产奠定了基础。
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