【摘 要】
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为改善二氧化硅载体材料本身的生物相容性和疏水性,维持包埋生物分子的活性,对水解前驱体3-氨基丙基三甲氧基硅烷进行了氨基酸分子改性.采用N-Fmoc-L-缬氨酸和氯化亚砜反应生
【机 构】
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北京科技大学化学与生物工程学院化学系
【基金项目】
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国家自然科学基金(批准号:20873005);北京市自然科学基金(批准号:2083028)资助
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为改善二氧化硅载体材料本身的生物相容性和疏水性,维持包埋生物分子的活性,对水解前驱体3-氨基丙基三甲氧基硅烷进行了氨基酸分子改性.采用N-Fmoc-L-缬氨酸和氯化亚砜反应生成N-Fmoc-L-缬氨酰氯,再与3-氨基丙基三甲氧基硅烷反应生成N-(3-三甲氧基硅基)丙基-N’-Fmoc-L-缬氨酰胺.然后去除Fmoc,得到N-(3-三甲氧基硅基)丙基-L-缬氨酰胺.通过IR,MS和1H NMR等分析手段对合成化合物的结构进行了表征.以正硅酸甲酯(TMOS)和N-(3-三甲氧基硅基)丙基-L-缬氨酰胺为复合硅源,经过溶胶-凝胶法包埋胰蛋白酶,当N-(3-三甲氧基硅基)丙基-L-缬氨酰胺的摩尔分数为15%时,固定化胰蛋白酶活力的绝对值为199 U,游离酶的酶活力绝对值为103 U,而四甲氧基硅烷直接包埋的固定化酶活力的活性仅为38 U.由杂化硅源得到的固定化酶的活性是以四甲氧基硅烷为水解前驱体的固定化酶活性的5倍.杂化硅源固定化胰蛋白酶比游离酶的最高活力提高近2倍.结果表明,氨基酸分子经水解前驱体修饰后,水解产生的固定化载体具有良好的生物相容性.通过改性载体制备的固定化酶对甲醇变性剂的稳定性、酸碱的抵抗性及热稳定性均有明显提高.
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