【摘 要】
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目的构建模拟小鼠IL-18(mIL-18)天然生成真核表达体系,并探讨其与人IL-2(hIL-2)真核表达载体pVR1012-hIL-2(phIL-2)体内外共转染对细胞免疫功能的影响.方法分别构建小鼠IL-18前体(mproIL-18)和小鼠IL-1β转换酶(mICE)的真核表达载体pVR1012-mproIL-18(pmproIL-18)和pEGFP-N1-mICE(pmICE).两者单独或共
【机 构】
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河北医科大学基础所免疫室,中国科学院生化细胞所细胞免疫组
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目的构建模拟小鼠IL-18(mIL-18)天然生成真核表达体系,并探讨其与人IL-2(hIL-2)真核表达载体pVR1012-hIL-2(phIL-2)体内外共转染对细胞免疫功能的影响.方法分别构建小鼠IL-18前体(mproIL-18)和小鼠IL-1β转换酶(mICE)的真核表达载体pVR1012-mproIL-18(pmproIL-18)和pEGFP-N1-mICE(pmICE).两者单独或共转染COS-7细胞,分别在mRNA和蛋白水平检测IL-18的表达;将pmproIL-18、pmICE和phIL-2 3种真核表达载体分别通过体内、外共转染,初步检测其生物学活性.结果pmproIL-18及pmICE构建正确,分别转染COS-7细胞后能检测到相应mRNA表达.在pm-proIL-18单独或pmproIL-18/pmICE共转染的COS-7细胞中能检测到前体和成熟2种不同形式的mIL-18蛋白表达,并且mIL-18能分泌到上清;所分泌的mIL-18与hIL-2体外联合作用可增强小鼠脾细胞增殖能力.pmproIL-18、pmICE和phIL-2 3种真核表达载体联合肌肉注射的小鼠脾细胞体外杀伤同基因型肿瘤细胞的能力显著提高.结论构建的模拟mIL-18天然生成的真核表达体系(pmproIL-18/pmICE)与phIL-2共转染有可能用于肿瘤的基因治疗.
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