【摘 要】
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凝结芽孢杆菌是乳酸工业化生产的主要发酵菌株之一,但在发酵结束时,发酵液中往往会残留（68）g/L的残糖。为了降低发酵液中的残糖含量,可以通过灭活原生质体融合技术引入外源可降
【机 构】
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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;
【基金项目】
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国家重点基础研究发展规划项目(2013CB733600)
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凝结芽孢杆菌是乳酸工业化生产的主要发酵菌株之一,但在发酵结束时,发酵液中往往会残留（68）g/L的残糖。为了降低发酵液中的残糖含量,可以通过灭活原生质体融合技术引入外源可降解残糖的酶基因来改善凝结芽孢杆菌降解残糖的能力。以凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）C菌株为供试菌株,考察了酶浓度、酶解温度和酶解时间对凝结芽孢杆菌原生质体制备与再生的影响。结果表明,在菌体OD620为10时,最适的酶解条件为:溶菌酶浓度0.14 mg/mL,酶解温度37℃,酶解时间10 min。在此条件下,原生质体的制备率为95.98%97.64%,再生率达到13.49%15.62%。在此基础上,分别考察了紫外致死和高温致死对凝结芽孢杆菌原生质体再生的影响。当紫外照射360 s和70℃高温处理25 min时,原生质体的致死率都能达到100%,这为后续的原生质体融合奠定了基础。
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