【摘 要】
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目的构建起搏基因质粒pIRES2-EGFP-mHCN2并转染到大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）,检测其在MSCs中核酸和蛋白水平是否表达。方法采用密度梯度离心法分离获得MSCs。EcoRⅠ和BamHⅠ双
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院心内科,华中科技大学同济医学院附属同济医院综合科
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目的构建起搏基因质粒pIRES2-EGFP-mHCN2并转染到大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）,检测其在MSCs中核酸和蛋白水平是否表达。方法采用密度梯度离心法分离获得MSCs。EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切质粒pGH-mHCN2和pIRES2-EGFP,回收目的片段,T4DNA连接酶连接。转化筛选阳性菌落,酶切和测序鉴定mHCN2是否插入pIRES2-EGFP中。脂质体转染质粒pIRES2-EGFP-mHCN2至MSCs,荧光显微镜下鉴定,并采用RT-PCR方法和Western blot方法分别检测转染质
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