WT-L1与Co（II）-L1的光谱表征及催化水解β-内酰胺类抗生素的动力学研究

来源 :中国抗生素杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：chenhuiww060606

【摘要】

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目的表征金属β-内酰胺酶（MBL）L1的结构和动力学特性，以其发展MBL的通用型抑制剂。方法在大肠埃希菌BL2I（DE3）中表达并纯化野生型L1（WildtypeL1，WT-L1），以SDS．PAGE电泳确认；用EDTA除去WT

【作者】

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闫小艳高会洲冯吉利杨霞杨科武

【机构】

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合成与天然功能分子化学教育部重点实验室

【出处】

：

中国抗生素杂志

【发表日期】

：

2011年5期

【关键词】

：

金属β-内酰胺酶L1 金属酶重组光谱表征 β-内酰胺类抗生素:酶催化动力学 Metallo-β-lactamase L1 Recombination of m

【基金项目】

：

基金项目：国家自然科学基金（20972127）,教育部博士点基金（200806970005）,人力资源部基金（SLZ2008013）,陕西省自然科学基金（2009JM2002）和陕西省教育厅基金（09JK786）

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目的表征金属β-内酰胺酶（MBL）L1的结构和动力学特性，以其发展MBL的通用型抑制剂。方法在大肠埃希菌BL2I（DE3）中表达并纯化野生型L1（WildtypeL1，WT-L1），以SDS．PAGE电泳确认；用EDTA除去WT-L1中的Zn（II）离子得Apo-L1，再用Co（II）滴定制得Co（II）-L1；通过UV-Vis，CD及荧光光谱表征WT-L1及Co（II）-L1活性中心的结构；采用稳态动力学方法测定WT-L1及Co（II）-L1催化3类9种β-内酰胺类抗生素水解反应的酶动力学参数，确定抗生

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