含人IL-12基因的重组质粒p2Bac-hIL-12p35p40的构建

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用PCR技术克隆hIL-12p35和p40两个亚基的cDNA,经酶切反应和琼脂电泳,获得的p35和p40基因的大小分别为0.77kb和1.1kb。SK+质粒酶切后和p35、p40片段分别进行连接.形成SK+-p35和SK+-p40重组质粒。再经酶切反应.p35、p40片段先后连接至p2Bac质粒中,形成同时含有hIL-12两个亚基基因的重组质粒p2Bac-hIL-12p35p40。SK+-p35和SK+-p40作为模板,进行p35、p40重组基因的测序,其结果与文献报道一致。 The cDNAs of hIL-12p35 and p40 subunits were cloned by PCR. The sizes of p35 and p40 genes obtained by restriction enzyme digestion and agarose electrophoresis were 0.77kb and 1.1kb, respectively. After SK + plasmid digestion and p35, p40 fragments were connected. The SK + -p35 and SK + -p40 recombinant plasmids were formed. Restriction enzyme reaction. The p35 and p40 fragments were ligated into the p2Bac plasmids in succession to form a recombinant plasmid p2Bac-hIL-12p35p40 containing both hIL-12 subunit genes. SK + -p35 and SK + -p40 as a template, p35, p40 recombinant gene sequencing, the results reported in the literature.
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