【摘 要】
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背景：心肌细胞凋亡在心肌缺血再灌注损伤中扮演了重要角色。最新研究表明生殖系统调控分子PIWI相互作用RNA （PIWI-Interacting RNA,piRNA）参与了心脏病理过程调控，然而在心肌细胞凋亡中的作用尚未阐明，尤其涉及线粒体途径的机制尚不清楚。目的：探究piRNA-5938对心肌细胞凋亡和线粒体分裂的调节作用及分子机制。方法：深度测序检测正常和缺血再灌注模型小鼠及大鼠心脏中piRNA
【机 构】
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山西医科大学细胞生理学教育部重点实验室山西省细胞生理学重点实验室山西医科大学生理学系
【基金项目】
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国家自然科学基金（82170294,81800268）,项目负责人:孙腾;国家自然科学基金（82170523）,项目负责人:曹济民； 山西省“1331工程”基础医学重点学科建设计划（XK201708）,项目负责人:曹济民,项目参与人:孙腾～～；
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背景：心肌细胞凋亡在心肌缺血再灌注损伤中扮演了重要角色。最新研究表明生殖系统调控分子PIWI相互作用RNA （PIWI-Interacting RNA,piRNA）参与了心脏病理过程调控，然而在心肌细胞凋亡中的作用尚未阐明，尤其涉及线粒体途径的机制尚不清楚。目的：探究piRNA-5938对心肌细胞凋亡和线粒体分裂的调节作用及分子机制。方法：深度测序检测正常和缺血再灌注模型小鼠及大鼠心脏中piRNA的表达丰度，实时荧光定量PCR法验证结果。分别用双氧水和缺氧再复氧条件构建心肌细胞凋亡模型，实时荧光定量PCR法检测piRNA-5938的表达水平。合成piPNA-5938特异性拮抗剂转染心肌细胞，再用双氧水处理，TUNEL法检测细胞凋亡情况，MitoTracker法检测线粒体分裂情况。RNAhybrid软件预测与piRNA-5938相互作用的microRNA。结果与结论：（1）与假手术组比，缺血再灌注小鼠心脏中422种piRNA表达水平改变，其中289条上调，133条下调；piRNA-5938的表达显著增加（P ＜0.01）；（2）双氧水诱导心肌细胞凋亡后pi RNA-5938的表达水平显著上调，且呈浓度依赖性（P ＜0.05）；（3）缺氧再复氧诱导心肌细胞凋亡后piRNA-5938表达显著增加（P ＜0.01）；（4）与阴性对照组比，敲低piRNA-5938后，双氧水诱导的心肌细胞凋亡率明显降低（P ＜0.05）；（5）敲低piRNA-5938后，双氧水诱导的心肌细胞线粒体分裂明显得到改善（P ＜0.05）；（6）piRNA-5938与线粒体分裂调控分子miR-324和miR-668序列能很好地互补配对，且具有高度保守性；（7）提示piRNA-5938调控了心肌细胞凋亡和线粒体分裂，并且可能通过miR-324或miR-668发挥作用。
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