一步法直接克隆PCR产物

来源 :国外医学.遗传学分册 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kf_haiyang
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一步法直接克隆PCR产物很多耐高温DNA多聚酶的PCR产物3’端带有突出的腺嘌呤,这就阻碍了该产物与载体DNA的平头末端连接。这个难点可以采用以下方法克服①在dNTP存在的条件下利用T4DNA多聚酶“补齐”PCR产物的末端;②利用克隆试剂盒,该试剂盒... Direct Cloning of PCR Products by One-Step Many of the PCR products of high temperature-resistant DNA polymerases have prominent adenine at the 3 ’end, which hinders the blunt-end ligation of the product with the vector DNA. This difficulty can be overcome in the following ways: ① T4 DNA polymerase in the presence of dNTP polymerase “complement” the end of the PCR product; ② using cloning kit, the kit ...
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