【摘 要】
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目的 研究结核分枝杆菌(MTB)甘露糖冠化的脂阿拉伯甘露聚糖(ManLAM)脂糖诱导肥大细胞产生的外泌体招募并影响巨噬细胞极化从而逃避机体免疫的机制.方法 培养H37Rv MTB并提取
【机 构】
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皖南医学院第二附属医院基础实验室及血管性疾病研究中心,安徽芜湖241000;皖南医学院附属弋矶山医院输血科,安徽芜湖241000;湖北医药学院附属太和医院检验科,湖北十堰442700;皖南医学院第二附
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目的 研究结核分枝杆菌(MTB)甘露糖冠化的脂阿拉伯甘露聚糖(ManLAM)脂糖诱导肥大细胞产生的外泌体招募并影响巨噬细胞极化从而逃避机体免疫的机制.方法 培养H37Rv MTB并提取鉴定ManLAM.将提取的ManLAM处理肥大细胞,并收集其分泌的外泌体,通过蛋白质组学和Western blot法分析鉴定外泌体中蛋白质组分.将收集的外泌体与THP-1细胞诱导分化的巨噬细胞共培养,通过Transwell?实验检测肥大细胞释放的外泌体对巨噬细胞的趋化作用,流式细胞术和实时定量PCR检测ManLAM诱导的巨噬细胞极化.结果 成功提取并纯化了 ManLAM,并通过气相色谱鉴定其甘露糖和阿拉伯糖的比例约为12.6∶9.4;ManLAM通过与肥大细胞的Toll样受体2(TLR2)结合,产生的外泌体中CC趋化因子配体2(CCL2)、白细胞介素4(IL-4)和IL-13水平较高;ManLAM诱导产生的外泌体能够招募巨噬细胞并且促进其高表达M2型标志分子精氨酸酶1(arginase-1)、IL-10和发现于炎症区分子1(FIZZ-1).结论 ManLAM刺激肥大细胞分泌外泌体间接诱导巨噬细胞向M2型极化使MTB逃避免疫清除.
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