SARS-CoV核衣壳蛋白的体外表达及单克隆抗体功能鉴定

来源 :浙江大学学报(农业与生命科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：a98466

【摘要】

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为对SARS N蛋白的功能进行研究,并建立快速、方便的诊断方法,将已克隆、构建成功的重组质粒PGEX-4T/N转化至E.coli BL21中,IPTG诱导表达,表达产物与兔源GST多抗在66 kD处有很

【作者】

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陈洪勋严兴成应建跃吴建祥周继勇

【机构】

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浙江大学,浙江大学,浙江大学

【出处】

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浙江大学学报(农业与生命科学版)

【发表日期】

：

2005年2期

【关键词】

：

严重急性呼吸综合征(SARS) 冠状病毒 N蛋白单克隆抗体 SARS coronavirus nucleocapsid protein monoclon

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为对SARS N蛋白的功能进行研究,并建立快速、方便的诊断方法,将已克隆、构建成功的重组质粒PGEX-4T/N转化至E.coli BL21中,IPTG诱导表达,表达产物与兔源GST多抗在66 kD处有很强的反应性,融合蛋白GST-N分别通过GSTrap FF 1 mL纯化柱和割胶纯化两种方法获得了具有生物活性和变性的融合蛋白.其蛋白浓度分别为0.85 mg/mL和0.433 mg/mL.利用纯化的GST-N蛋白免疫SPF BALB/c小鼠,获得4株能稳定传代并分泌抗SARS N单克隆抗体(mAb)的杂交瘤

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