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摘要 [目的] 对湖北省某猪场发生的以体温升高、部分病猪死亡等为主要特征的疾病进行诊断。[方法] 采集发病猪的脾脏、淋巴结等样品，应用PCR方法进行实验室检测。[结果] 经实验室检验，结合临床症状，诊断为HPPRRSV及PCV2混合感染。高致病性猪蓝耳病毒阳性率为40%，猪圆环病毒2型阳性率为90%。[结论]通过采取综合防控措施，病情得到有效控制，减少了猪场的经济损失。
关键词 高致病性猪蓝耳病毒；猪圆环病毒2型；混合感染；诊断
中圖分类号 S852.65+1 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）17-05495-02
Abstract [Objective] The research aimed to diagnose the disease with higher body temperature and death of some pigs as main characteristics in a pig farm in Hubei Province.[Method] The spleen and lymph node and other samples of diseased pigs were collected to make laboratory detection by PCR method. [Result] It was diagnosed as the mixed infection of HPPRRSV and PCV2 by laboratory detection based on the clinical symptoms. The positive rate of HPPRRSV was 40% and PCV2 positive rate was 90%. [Conclusion] The disease was effectively controlled by taking the comprehensive prevention and control measures， which reduced the economic loss of pig farm.
Key words HPPRRS V； PCV2； Mixed infection； Diagnosis
猪繁殖与呼吸综合征（Porcine.reproductive and respiratory syndrome，PRRS）又称猪蓝耳病，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的，以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病为主要症状的猪主要传染病之一[1]。郭宝清等[2]于1996年从北京地区分离到PRRSV，首次证实了PRRS在我国的发生。2006～2007年猪“高热病”在我国的大部分省区发生，给养猪业造成了巨大的经济损失，其主要病原之一是变异的PRRSV，也称为高致病性PRRSV（HPPRRSV）[3]。
猪圆环病毒病（PCVD）是由猪圆环病毒2型（PCV2）引起的一种传染病。PCV2可导致断奶仔猪多系统衰竭综合征的发生，也与猪的肾病、皮炎综合征和仔猪先天性震颤相关[4]。PCV2不仅造成猪生长缓慢、饲料报酬降低，还可造成机体免疫抑制，引起其他疾病的爆发[5]，严重危害养猪业的发展。
2013年10月，湖北省某猪场发生了以体温升高、食欲减退、咳嗽，部分病猪死亡为特征的疾病，剖检采样后经实验室检验，结合临床症状，诊断为HPPRRSV及PCV2混合感染。该猪场发病猪为3月龄以上育肥猪，初期发病猪30余头，此后发病猪逐渐增多，发病猪约450头；临床症状主要为：病猪体温41 ℃左右，咳嗽，食欲减退，部分病猪皮肤发红，部分病猪皮肤苍白，病重者呼吸困难，最后导致死亡。剖检病变主要为肺部间质性肺炎，心包积液，肾脏有出血点，胃充血，脾脏稍有肿大，颌下淋巴结及腹股沟淋巴结肿大。采集脾脏、淋巴结等样品以供实验室检验。对发病猪曾用抗生素类药物治疗，疗效不理想。该猪场于仔猪21日龄同时注射猪蓝耳病疫苗和猪圆环病毒疫苗。采取综合防治措施后，病情得到有效控制，减少了猪场的经济损失。
1 材料与方法
1.1 供试材料
供试样品为10份组织样品。DNA、RNA提取试剂盒、Taq DNA聚合酶，均购自TaKaRa公司；RNA反转录试剂盒，购自Fermantas公司；引物均由上海Sangon生物工程公司合成。
1.2 检测方法
高致病性猪蓝耳病毒株与普通株鉴别采用反转录-聚合酶链式反应（RTPCR）方法，PCV2病原检测采用聚合酶链式反应（PCR）方法，试验方法均按照试剂盒说明书及分子克隆实验指南（第3版）[6]操作。
3 讨论
（1）根据实验室检验结果，HPPRRSV阳性率为40%（4/10），PCV2阳性率为90%（9/10），结合临床症状、剖检变化，诊断该猪场发生的疾病为HPPRRSV及PCV2混合感染。
（2）针对诊断结果，通过采取综合防控措施，病情得到了有效控制。
①隔离消毒。对发病猪群立即采取隔离措施，并且由专人负责饲养管理。加强猪场内消毒，每2～3 d全场消毒1次，最大限度消灭猪场内的传染源，降低猪群感染PRRSV、PCV2及其他病原继发感染的概率；适当调整猪群饲养密度，保持场内环境清洁卫生，保证给予猪群舒适干净的生长环境。猪场的饲养员严禁交叉串栋。对病死猪严格进行无害化处理。
②对症治疗。治疗手段以控制细菌继发感染和增强猪体的免疫机能为主。选用替米考星、盐酸多西环素等抗菌药物，配合使用黄芪多糖、电解多维等药物，保证充足饮水，必要时可采取输液等方法进行治疗，加强护理，促进机体康复。
③免疫接种。对未发病猪群使用猪高致病蓝耳 病疫苗和猪圆环病毒疫苗进行紧急免疫接种，2种疫苗免疫 时间要有一定的间隔，注射疫苗保证免疫到位，提高猪群整体的免疫力，防制疾病继续发生和扩散。 （3）此次疾病的发生可能是因为该猪场同时免疫猪蓝耳病疫苗和猪圆环病毒疫苗2种疫苗，导致免疫失败而引起。众所周知，高致病性猪蓝耳病是一种免疫抑制疾病，是目前困扰养猪正常生产的重要传染病之一。由于PRRSV侵害免疫系统后能形成持续性感染，猪场感染后的帶毒率较高，有的猪场即使已进行疫苗免疫，仍然可能零星发生或隐形带毒。因此，在实际生产中防治猪蓝耳病，不仅要选用高效安全的疫苗，进行科学免疫接种，还应做好生物安全规范、加强饲养管理、完善预警监测等其他综合防控措施。
（4）猪圆环病毒病也是一种免疫抑制疾病，病原可破坏机体的免疫系统，导致机体抗病力降低。PCV2经常与PRRSV、猪伪狂犬病毒、副嗜血杆菌等病原发生混合感染或继发感染，如果猪场发病后，疫情会更加严重，病死率也大大增加。当PCV2与PRRSV同时感染时，PRRSV可以促进PCV2在体内的增殖。目前对猪圆环病毒病的防制主要是使用灭活疫苗对猪群进行免疫预防，同时结合生物安全、饲养管理和药物预防等综合防控措施，以达到防治该病的目的。
综上所述，对猪蓝耳病和猪圆环病毒病的防制，应采取健全生物安全措施、科学免疫接种、定期病原监测和加强饲养管理等综合防控措施，才能有效控制疾病的发生。若要消除PRRSV和PCV2，可考虑清除带毒猪，以达到净化疾病的目的，净化实施过程中由于涉及大量种猪的淘汰和引进更新，投入的时间和经济成本都会很高，可考虑先由原种猪场实施。
参考文献
[1]DEA S，ROSSOW R.Current knowledge on the structural proteins of porcine reproductive and respiratory syndrome virus（PRRSV）：comparision of the North American and European isolates[J].Arch Virol，2000，145：659-688.
[2] SHEN S，MENG X，WESLY R，et al.Determination of the cornplete nucleotide sequence of a accine strain of porcine reproductive and respiratory syndrome virus and identification of the Nsp2 gene with a unique insertion[J].Arch Virol，2000，145：871-883.
[3] 何世成，邹敏，刘道新，等.高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒RT—PCR检测方法的建立[J].动物医学进展，2009，30（7）：10-13.
[4] 周继勇，陈庆新，叶菊秀，等.猪圆环病毒2型感染的血清学分析[J].中国兽医学报，2004，24（1）：1-3.
[5] 郭锐，曹宏云，田永祥，等.猪圆环病毒病的综合防制[J].国外畜牧学-猪与禽，2010，30（6）：90-92.
[6] 赵德明，张中秋，沈建中，等.猪病学[M].9版.北京：中国农业大学出版社，2008：332-333.
关键词 高致病性猪蓝耳病毒；猪圆环病毒2型；混合感染；诊断
中圖分类号 S852.65+1 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）17-05495-02
Abstract [Objective] The research aimed to diagnose the disease with higher body temperature and death of some pigs as main characteristics in a pig farm in Hubei Province.[Method] The spleen and lymph node and other samples of diseased pigs were collected to make laboratory detection by PCR method. [Result] It was diagnosed as the mixed infection of HPPRRSV and PCV2 by laboratory detection based on the clinical symptoms. The positive rate of HPPRRSV was 40% and PCV2 positive rate was 90%. [Conclusion] The disease was effectively controlled by taking the comprehensive prevention and control measures， which reduced the economic loss of pig farm.
Key words HPPRRS V； PCV2； Mixed infection； Diagnosis
猪繁殖与呼吸综合征（Porcine.reproductive and respiratory syndrome，PRRS）又称猪蓝耳病，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的，以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病为主要症状的猪主要传染病之一[1]。郭宝清等[2]于1996年从北京地区分离到PRRSV，首次证实了PRRS在我国的发生。2006～2007年猪“高热病”在我国的大部分省区发生，给养猪业造成了巨大的经济损失，其主要病原之一是变异的PRRSV，也称为高致病性PRRSV（HPPRRSV）[3]。
猪圆环病毒病（PCVD）是由猪圆环病毒2型（PCV2）引起的一种传染病。PCV2可导致断奶仔猪多系统衰竭综合征的发生，也与猪的肾病、皮炎综合征和仔猪先天性震颤相关[4]。PCV2不仅造成猪生长缓慢、饲料报酬降低，还可造成机体免疫抑制，引起其他疾病的爆发[5]，严重危害养猪业的发展。
2013年10月，湖北省某猪场发生了以体温升高、食欲减退、咳嗽，部分病猪死亡为特征的疾病，剖检采样后经实验室检验，结合临床症状，诊断为HPPRRSV及PCV2混合感染。该猪场发病猪为3月龄以上育肥猪，初期发病猪30余头，此后发病猪逐渐增多，发病猪约450头；临床症状主要为：病猪体温41 ℃左右，咳嗽，食欲减退，部分病猪皮肤发红，部分病猪皮肤苍白，病重者呼吸困难，最后导致死亡。剖检病变主要为肺部间质性肺炎，心包积液，肾脏有出血点，胃充血，脾脏稍有肿大，颌下淋巴结及腹股沟淋巴结肿大。采集脾脏、淋巴结等样品以供实验室检验。对发病猪曾用抗生素类药物治疗，疗效不理想。该猪场于仔猪21日龄同时注射猪蓝耳病疫苗和猪圆环病毒疫苗。采取综合防治措施后，病情得到有效控制，减少了猪场的经济损失。
1 材料与方法
1.1 供试材料
供试样品为10份组织样品。DNA、RNA提取试剂盒、Taq DNA聚合酶，均购自TaKaRa公司；RNA反转录试剂盒，购自Fermantas公司；引物均由上海Sangon生物工程公司合成。
1.2 检测方法
高致病性猪蓝耳病毒株与普通株鉴别采用反转录-聚合酶链式反应（RTPCR）方法，PCV2病原检测采用聚合酶链式反应（PCR）方法，试验方法均按照试剂盒说明书及分子克隆实验指南（第3版）[6]操作。
3 讨论
（1）根据实验室检验结果，HPPRRSV阳性率为40%（4/10），PCV2阳性率为90%（9/10），结合临床症状、剖检变化，诊断该猪场发生的疾病为HPPRRSV及PCV2混合感染。
（2）针对诊断结果，通过采取综合防控措施，病情得到了有效控制。
①隔离消毒。对发病猪群立即采取隔离措施，并且由专人负责饲养管理。加强猪场内消毒，每2～3 d全场消毒1次，最大限度消灭猪场内的传染源，降低猪群感染PRRSV、PCV2及其他病原继发感染的概率；适当调整猪群饲养密度，保持场内环境清洁卫生，保证给予猪群舒适干净的生长环境。猪场的饲养员严禁交叉串栋。对病死猪严格进行无害化处理。
②对症治疗。治疗手段以控制细菌继发感染和增强猪体的免疫机能为主。选用替米考星、盐酸多西环素等抗菌药物，配合使用黄芪多糖、电解多维等药物，保证充足饮水，必要时可采取输液等方法进行治疗，加强护理，促进机体康复。
③免疫接种。对未发病猪群使用猪高致病蓝耳 病疫苗和猪圆环病毒疫苗进行紧急免疫接种，2种疫苗免疫 时间要有一定的间隔，注射疫苗保证免疫到位，提高猪群整体的免疫力，防制疾病继续发生和扩散。 （3）此次疾病的发生可能是因为该猪场同时免疫猪蓝耳病疫苗和猪圆环病毒疫苗2种疫苗，导致免疫失败而引起。众所周知，高致病性猪蓝耳病是一种免疫抑制疾病，是目前困扰养猪正常生产的重要传染病之一。由于PRRSV侵害免疫系统后能形成持续性感染，猪场感染后的帶毒率较高，有的猪场即使已进行疫苗免疫，仍然可能零星发生或隐形带毒。因此，在实际生产中防治猪蓝耳病，不仅要选用高效安全的疫苗，进行科学免疫接种，还应做好生物安全规范、加强饲养管理、完善预警监测等其他综合防控措施。
（4）猪圆环病毒病也是一种免疫抑制疾病，病原可破坏机体的免疫系统，导致机体抗病力降低。PCV2经常与PRRSV、猪伪狂犬病毒、副嗜血杆菌等病原发生混合感染或继发感染，如果猪场发病后，疫情会更加严重，病死率也大大增加。当PCV2与PRRSV同时感染时，PRRSV可以促进PCV2在体内的增殖。目前对猪圆环病毒病的防制主要是使用灭活疫苗对猪群进行免疫预防，同时结合生物安全、饲养管理和药物预防等综合防控措施，以达到防治该病的目的。
综上所述，对猪蓝耳病和猪圆环病毒病的防制，应采取健全生物安全措施、科学免疫接种、定期病原监测和加强饲养管理等综合防控措施，才能有效控制疾病的发生。若要消除PRRSV和PCV2，可考虑清除带毒猪，以达到净化疾病的目的，净化实施过程中由于涉及大量种猪的淘汰和引进更新，投入的时间和经济成本都会很高，可考虑先由原种猪场实施。
参考文献
[1]DEA S，ROSSOW R.Current knowledge on the structural proteins of porcine reproductive and respiratory syndrome virus（PRRSV）：comparision of the North American and European isolates[J].Arch Virol，2000，145：659-688.
[2] SHEN S，MENG X，WESLY R，et al.Determination of the cornplete nucleotide sequence of a accine strain of porcine reproductive and respiratory syndrome virus and identification of the Nsp2 gene with a unique insertion[J].Arch Virol，2000，145：871-883.
[3] 何世成，邹敏，刘道新，等.高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒RT—PCR检测方法的建立[J].动物医学进展，2009，30（7）：10-13.
[4] 周继勇，陈庆新，叶菊秀，等.猪圆环病毒2型感染的血清学分析[J].中国兽医学报，2004，24（1）：1-3.
[5] 郭锐，曹宏云，田永祥，等.猪圆环病毒病的综合防制[J].国外畜牧学-猪与禽，2010，30（6）：90-92.
[6] 赵德明，张中秋，沈建中，等.猪病学[M].9版.北京：中国农业大学出版社，2008：332-333.