【摘 要】
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目的:探讨龙葵碱对人乳腺癌MCF-7细胞顺铂敏感性的影响及作用机制.方法:取MCF-7细胞以0、3、6、9、12、15nmol/ml龙葵碱培养48h,采用MTT法检测增殖活性,流式细胞仪检测凋亡情况.取MCF-7细胞分别以0、3、6nmol/ml龙葵碱加上每个浓度使用0、3、6、9、12、15μg/ml梯度浓度的顺铂处理,采用MTT法检测增殖活性,计算不同浓度龙葵碱的顺铂半数抑制浓度(LC50).Western blot法检测0、3、6nmol/ml龙葵碱加上6μg/ml顺铂培养后化疗敏感相关蛋白ERCC
【机 构】
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四川省荣县人民医院普外科,四川 自贡643100;自贡第四人民医院普外科,四川 自贡643000
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目的:探讨龙葵碱对人乳腺癌MCF-7细胞顺铂敏感性的影响及作用机制.方法:取MCF-7细胞以0、3、6、9、12、15nmol/ml龙葵碱培养48h,采用MTT法检测增殖活性,流式细胞仪检测凋亡情况.取MCF-7细胞分别以0、3、6nmol/ml龙葵碱加上每个浓度使用0、3、6、9、12、15μg/ml梯度浓度的顺铂处理,采用MTT法检测增殖活性,计算不同浓度龙葵碱的顺铂半数抑制浓度(LC50).Western blot法检测0、3、6nmol/ml龙葵碱加上6μg/ml顺铂培养后化疗敏感相关蛋白ERCC1、PTEN、局部粘着斑激酶(FAK)以及PI3K、Akt、p-Akt蛋白相对表达量,以常规培养MCF-7细胞作为对照组.结果:培养48h后,12、15nmol/ml龙葵碱组MCF-7细胞存活率分别为(86.52±5.46)％和(61.28±7.26)％,与0nmol/ml龙葵碱组相比显著降低(P＜0.05);12、15nmol/ml龙葵碱组MCF-7细胞凋亡率分别为(12.68±3.09)％和(18.37±3.52)％,与0nmol/ml 龙葵碱组相比显著上升(P＜0.05);0、3、6nmol/ml龙葵碱浓度下,顺铂对MCF-7细胞LC50分别为8.65、6.07、4.82μg/ml,浓度依次降低;Western blot结果显示,3、6nmol/ml龙葵碱+顺铂组FAK、PI3K、p-Akt蛋白水平显著低于对照组和0nmol/ml龙葵碱+顺铂组,且6nmol/ml龙葵碱+顺铂组FAK、PI3K、p-Akt蛋白水平更低(P＜0.05).结论:龙葵碱提高人乳腺癌MCF-7细胞对顺铂的敏感性,其作用机制可能与抑制FAK-PI3K/Akt信号通路有关.
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