【摘 要】
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目的 建立基于流式细胞仪检测的体外嗜碱性粒细胞激活试验(human basophil activation test, h-BAT)方法,并探索该方法用于Ⅰ型变态反应检查的可行性.方法 利用人源白血病嗜
【机 构】
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浙江省食品药品检验研究院,国家药品监督管理局化妆品动物替代试验技术重点实验室,杭州310004;正大青春宝药业有限公司,杭州,310004
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目的 建立基于流式细胞仪检测的体外嗜碱性粒细胞激活试验(human basophil activation test, h-BAT)方法,并探索该方法用于Ⅰ型变态反应检查的可行性.方法 利用人源白血病嗜碱性粒细胞KU812在Ⅰ型变态反应过程中经阳性剂激活后,细胞特异性表面抗原CD63和CD203表达特异性增强的原理建立体外Ⅰ型变态反应模型,并同步用人组胺酶联免疫法进行验证.结果 确定以终浓度为2 μg·mL-1的N-甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸为阳性剂,孵育2h作为流式方法检测嗜碱性粒细胞激活的阳性成立条件,细胞相对组胺释放百分比增高结果进一步确认了阳性成立条件.结论 h-BAT法有测试简便、评价客观等优点,是一种较好的过敏反应细胞模型,可以用于现有豚鼠试验的替代.
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