人朊蛋白基因的克隆与原核表达

来源 :甘肃农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qzl11320583407
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以人血液中提取的总DNA为模板,克隆朊蛋白(pnon protein,PrP)基因Prnp的开放阅读框(ORF),与pMD-18T载体连接后转入E.coli JM109,用Blast软件比较重组质粒序列,结果表明获得的人Prnp的ORF与Genbank登录的相应核苷酸序列最高同源性为99.6%,推导的氨基酸序列同源性为99.8%.将编码人成熟PrP的基因定向克隆到pET-30a(+)表达载体,将重组质粒pET—homPrP转化E.coli BL21(DE3),在37℃下用1.0mmol/L IPTG诱导,
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