慢病毒介导RNA干扰Pin1异构酶的鼻咽癌稳定细胞株的建立和鉴定

来源 :现代肿瘤医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong595
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目的:应用慢病毒介导的RNA干扰技术,建立稳定表达siPin1的鼻咽癌细胞株。方法:将对照组病毒液lv-3和实验组病毒液siPin1感染CNE2细胞,通过嘌呤霉素和绿色荧光检测筛选siPin1稳定细胞株,在荧光显微镜下观察细胞的荧光表达,通过定量PCR和Westernblot鉴定siPin1细胞Pin1mRNA和蛋白的表达。结果:筛选siPin1稳定表达细胞株嘌呤霉素筛选浓度为1μg/ml,病毒感染后超过90%细胞发出绿色荧光,实验组siPin1与对照组lv-3相比,Pin1mRNA表达水平下降,West
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