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目的:运用无血清成球培养法从人胰腺癌细胞系L3.6pl中分离/富集肿瘤干细胞,并对其“干性”特性进行鉴定。方法采用无血清与低黏附细胞培养板诱导胰腺癌L3.6pl细胞产生肿瘤细胞球。收集悬浮细胞球形成细胞,采用磁性细胞分选(magnetic activated cell sorting,MACS)技术纯化胰腺癌L3.6pl细胞株中的CD24+CD44+ESA+细胞,继续在无血清条件下培养观察细胞的球体形成能力。 Western blot检测L3.6pl来源的干细胞中自我更新及上皮细胞间质化转变( epith