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摘要：依据农作物种子检验规程（GB/T3543.1～3543.7-1995），进行短柄乌头种子净度、千粒重、水分、发芽率的测定，旨在为有关部门制定短柄乌头种子的质量分级标准提供参考。结果表明，短柄乌头种子净度90.1%～92.0%、千粒重2.19g～2.30g、含水量10.7%～10.8%、发芽率85.6%～88.4%、发芽势54.9～57.6%。
关键词：短柄乌头；种子；质量标准；濒危药用植物
中图分类号：R284.2文献标志码：A文章编号：1007-2349（2014）04-0062-02
短柄乌头（AconitumbrachypodumDiels）又名雪山一枝蒿、一枝蒿、铁棒锤、铁牛七、三转半等，为毛茛科乌头属（Aconitum）多年生草本植物[1]。主要分布于云南、四川、西藏等省区，云南是其分布中心。短柄乌头性温，味苦、辛，有剧毒，能祛风除湿，消炎镇痛，用于风湿骨痛，跌扑肿痛及牙痛等症，疗效显著[2]。由于短柄乌头的块根含一枝蒿乙素等多种生物碱，民间用于治疗风湿疼痛、跌打损伤、镇痛等[3]。该品在1974年才正式收入《云南省药品标准》，1977年收入《中华人民共和国药典》。
目前短柄乌头用药完全依赖采挖野生资源，由于滥采滥挖，加之森林砍伐，使其生存环境受到破坏。另外受自然气候影响及本身自然繁殖力等因素，资源总量急剧下降，现已作为稀有濒危物种列于《中国植物红皮书》。短柄乌头主要以种子为繁殖材料[4]。当前由于短柄乌头种植面积不断扩大，种子需求量不断增加，对种子质量的要求也相应提高，而对短柄乌头种子质量标准的研究仍为空白。为准确判断短柄乌头种子质量的优劣，必须进行种子的品质检验。根据《农作物种子检验规程》，参照秦佳梅、张卫东等的方法对短柄乌头种子净度、千粒重、含水量、发芽率等进行测定，初步制定了短柄乌头种子质量分级标准[5]。
1材料与方法
1.1供试材料短柄乌头（AconitumbrachypodumDiels），2011年10月采自云南省会泽县大海草山短柄乌头栽培基地。
1.2仪器及药品实体解剖镜、游标卡尺、电子天平（分值度0.01g）、玻璃培养皿、光照培养箱、50%多菌灵可湿性粉剂。
1.3取样取样分3步进行：第1步，先从待检验的同批量种子中取若干少量样品，于不同种子袋中分上、中、下3层分别取样，再将这些样品混合起来，作为原始样品；第2步，将短柄乌头种子原始样品倒在平滑桌面上，混合均匀后，平铺摊成1～2cm厚的正方形，按对角线把种子分成4个三角形，除去两个相对的三角形（即十字分样法），再把种子重新混合，按上法继续分样；第3步，仍用十字分样法从平均样品中分出一定数量的种子，直接用于鉴定种子各项品质的小样品[6]。
1.4试验方法
1.4.1种子形态鉴别取成熟的短柄乌头种子若干粒，放在座标纸上，于实体解剖镜下观察种子形态，并测量种子大小。
1.4.2种子净度测定用电子天平称4.00g供试种子，分选出杂质、废种子及其它异类种子，用电子天平分别称量，重复3次。符合规定容许差值时，将3次测定结果的平均值作为所测本批次短柄乌头种子的纯净度。
1.4.3种子千粒重的测定从净种子中随机数取1000粒，用电子天平称重（精确度为0.01g），重复3次。千粒重容许误差小于5%。
1.4.4种子含水量的测定称取2.00g供试样品，先将称量盒放在105℃下烘干，并称重，再将试样放在称量盒内，放入预热到140℃的干燥箱中，烘干1h，称重。
种子含水量（%）=（试样烘干前重—试样烘干后重）/试样烘干前重×100%。
1.4.5种子发芽率和发芽势的检测从净种子中随机数取100粒，用0.5%多菌灵可湿性粉剂溶液浸泡24h。把种子摆放在铺有2层湿润脱脂棉滤纸的培养皿中，置于光照培养箱中，25℃条件下进行培养，注意定时检查皿内湿度。重复3次，观察和记录发芽情况[7]。
2结果与分析
2.1种子形态短柄乌头蓇葖果棒状，长约0.7cm，内有种子多枚，短柄乌头种子极为细小，长（4.16±0.38）mm，宽（2.45±0.27）mm，厚（1.47±0.12）mm，呈不规则的三角形，外表具3条棱线，边缘短翅，背面拱，中央棱加宽，表面灰黑色、褐色，具瘤状突起。种仁长圆形，黄色、黄褐色。
2.2种子净度种子净度是指在供试样品中除去杂质、废种子及其它异类种子后，本品种饱满种子占供试样品重量的百分率。检测结果见表1。种子净度是衡量种子品质的一项重要指标，优良的种子应不含任何杂质和其他废品。净度低的种子，种子内含杂质多，种子的利用率低，影响种子贮藏与运输安全。3次检测结果表明，每两次的差值都在容许范围内，表明本次检测的短柄乌头种子样品净度为（90.1～92.0）%。但短柄乌头种子质脆，在脱壳过程中易受损伤，脱壳后的种子中混有细茎残体、果皮，不易分离，生产中只要求达到80%左右即可。
表1种子净度测定结果
供试样品
（g）测定
次数优质种子
重（g）废种子、杂
质重（g）净纯度
（%）差值平均值
（%）
4.0913.6850.40590.11.9
4.0823.7900.29092.91.291.9
4.0933.7910.29992.70.9
注：容许差值<2.59%
2.3种子千粒重种子千粒重是指在风干状态下1000粒净种子的重量，千粒重是衡量种子活力的重要指标之一，粒大、饱满充实的种子，其内部贮藏的营养物质多，发芽整齐，出苗率高，幼苗健壮。测定千粒重是鉴别种子大小，饱满程度非常简便的方法。测试结果见表2。从表2看出，每两次检测的差值在容许差值内，短柄乌头种子千粒重在2.19g～2.30g左右。 表2短柄乌头种子千粒重测定结果
重复次数千粒重
（g）差值平均值
（g）差值占平均重量的
百分数（%）
12.160.093.9
22.280.032.2571.3
32.330.062.6
注：容许差值<5.0%
2.4种子含水量种子含水量的高低直接影响种子贮藏、运输安全，进而影响种子生活力的高低，测定种子含水量，可为其安全贮藏、运输提供依据。检测结果见表3。
表3短柄乌头种子含水量的测定结果
重复次数种子干重（g）水分重量（g）含水量（%）平均值（%）
12.280.24810.9
22.290.24710.810.8
32.330.24910.7
注：容许差值<0.2%
从表3可见，两次检测的差值在容许差值范围内，表明短柄乌头种子的含水量为10.7%～10.9%。
2.5种子发芽率和发芽势发芽率是衡量种子质量的重要指标之一，种子能否正常发芽是衡量种子是否具有生活力的直接指标，也是决定田间出苗率的重要因素，对确定合理的播种量、改进种子贮藏方法和确定合理的种子价格等起着决定性作用。发芽势是指发芽试验初期，规定日期内正常发芽的种子数占供试种子的百分率。种子发芽势高，表示种子生活力强，发芽整齐，出苗一致。检测结果为：种子发芽率为85.3%～88.4%，发芽势为54.9～57.4%。
表4短柄乌头种子的发芽率和发芽势
供试种子
（粒）发芽数霉烂数未发芽数发芽率
（%）差值发芽势
（%）
1028713285.3454.9
1008712187.0356.0
1089611188.9157.4
平均90121.3387.07—56.1
注：发芽势为发芽8d发芽数/供试种子数，容许差值<5.0%
表5短柄乌头种子质量分级标准
等级净度
（%）含水量
（%）千粒重
（g）发芽率
（%）外形特征
Ⅰ≥90≤10.86≥2.35≥90饱满，大小均匀，无破损
Ⅱ≥85≤10.86≥2.20≥85较饱满，大小较均匀，无破损
Ⅲ≥80≤10.86≥2.10≥70饱满程度一般，大小较均匀，无破损
3结论与讨论
3.1种子分级标准因短柄乌头种子质量分级目前还没有国家标准和地方标准，本试验严格按照《农作物种子检验规程》及有关种子分级方法，其结果可作为短柄乌头种子质量分级标准的参考。根据以上分级标准。种子可视为劣种，不能销售。
3.2讨论种子质量是决定中药材质量的重要因素，是促进中药材生产发展的重要保证。对种子质量的监控，保证种子质量，是进行中药材标准化生产的重要措施。本文提供的短柄乌头种子分级标准是在试验研究的基础上提出的，是短柄乌头生产质量管理的组成部分。可供有关部门对短柄乌头种子进行质量评价时参考。
参考文献：
[1]中国科学院植物志编辑委员会.中国植物志[M].第二十七卷.北京：科学出版社，1979：318-319.
[2]全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编[M].北京：人民卫生出版社，1973：703-704.
[3]陈永康，刘茂坤.家种与野生雪上一枝蒿总生物碱毒性与药理的比较研究[J].中国民族民间医药杂志，1997，24：38-42.
[4]袁理春，赵琪，陈翠，等.雪上一枝蒿繁殖技术初步研究[J].中药材，2003，27（4）：240-241.
[5]中华人民共和国国家标准（GB/T3543.1～3543.7-1995），农作物种子检验规程.
[6]秦佳梅，张卫东，刘凤莲.返魂草种子质量标准研究[J].种子，2006，25（12）：100-101.
[7]张国容，张进玉.乌拉尔甘草种子种苗分级标准制定[J].现代中药研究与实践，2004，18（5）：14-16.
（收稿日期：2014-02-20）
关键词：短柄乌头；种子；质量标准；濒危药用植物
中图分类号：R284.2文献标志码：A文章编号：1007-2349（2014）04-0062-02
短柄乌头（AconitumbrachypodumDiels）又名雪山一枝蒿、一枝蒿、铁棒锤、铁牛七、三转半等，为毛茛科乌头属（Aconitum）多年生草本植物[1]。主要分布于云南、四川、西藏等省区，云南是其分布中心。短柄乌头性温，味苦、辛，有剧毒，能祛风除湿，消炎镇痛，用于风湿骨痛，跌扑肿痛及牙痛等症，疗效显著[2]。由于短柄乌头的块根含一枝蒿乙素等多种生物碱，民间用于治疗风湿疼痛、跌打损伤、镇痛等[3]。该品在1974年才正式收入《云南省药品标准》，1977年收入《中华人民共和国药典》。
目前短柄乌头用药完全依赖采挖野生资源，由于滥采滥挖，加之森林砍伐，使其生存环境受到破坏。另外受自然气候影响及本身自然繁殖力等因素，资源总量急剧下降，现已作为稀有濒危物种列于《中国植物红皮书》。短柄乌头主要以种子为繁殖材料[4]。当前由于短柄乌头种植面积不断扩大，种子需求量不断增加，对种子质量的要求也相应提高，而对短柄乌头种子质量标准的研究仍为空白。为准确判断短柄乌头种子质量的优劣，必须进行种子的品质检验。根据《农作物种子检验规程》，参照秦佳梅、张卫东等的方法对短柄乌头种子净度、千粒重、含水量、发芽率等进行测定，初步制定了短柄乌头种子质量分级标准[5]。
1材料与方法
1.1供试材料短柄乌头（AconitumbrachypodumDiels），2011年10月采自云南省会泽县大海草山短柄乌头栽培基地。
1.2仪器及药品实体解剖镜、游标卡尺、电子天平（分值度0.01g）、玻璃培养皿、光照培养箱、50%多菌灵可湿性粉剂。
1.3取样取样分3步进行：第1步，先从待检验的同批量种子中取若干少量样品，于不同种子袋中分上、中、下3层分别取样，再将这些样品混合起来，作为原始样品；第2步，将短柄乌头种子原始样品倒在平滑桌面上，混合均匀后，平铺摊成1～2cm厚的正方形，按对角线把种子分成4个三角形，除去两个相对的三角形（即十字分样法），再把种子重新混合，按上法继续分样；第3步，仍用十字分样法从平均样品中分出一定数量的种子，直接用于鉴定种子各项品质的小样品[6]。
1.4试验方法
1.4.1种子形态鉴别取成熟的短柄乌头种子若干粒，放在座标纸上，于实体解剖镜下观察种子形态，并测量种子大小。
1.4.2种子净度测定用电子天平称4.00g供试种子，分选出杂质、废种子及其它异类种子，用电子天平分别称量，重复3次。符合规定容许差值时，将3次测定结果的平均值作为所测本批次短柄乌头种子的纯净度。
1.4.3种子千粒重的测定从净种子中随机数取1000粒，用电子天平称重（精确度为0.01g），重复3次。千粒重容许误差小于5%。
1.4.4种子含水量的测定称取2.00g供试样品，先将称量盒放在105℃下烘干，并称重，再将试样放在称量盒内，放入预热到140℃的干燥箱中，烘干1h，称重。
种子含水量（%）=（试样烘干前重—试样烘干后重）/试样烘干前重×100%。
1.4.5种子发芽率和发芽势的检测从净种子中随机数取100粒，用0.5%多菌灵可湿性粉剂溶液浸泡24h。把种子摆放在铺有2层湿润脱脂棉滤纸的培养皿中，置于光照培养箱中，25℃条件下进行培养，注意定时检查皿内湿度。重复3次，观察和记录发芽情况[7]。
2结果与分析
2.1种子形态短柄乌头蓇葖果棒状，长约0.7cm，内有种子多枚，短柄乌头种子极为细小，长（4.16±0.38）mm，宽（2.45±0.27）mm，厚（1.47±0.12）mm，呈不规则的三角形，外表具3条棱线，边缘短翅，背面拱，中央棱加宽，表面灰黑色、褐色，具瘤状突起。种仁长圆形，黄色、黄褐色。
2.2种子净度种子净度是指在供试样品中除去杂质、废种子及其它异类种子后，本品种饱满种子占供试样品重量的百分率。检测结果见表1。种子净度是衡量种子品质的一项重要指标，优良的种子应不含任何杂质和其他废品。净度低的种子，种子内含杂质多，种子的利用率低，影响种子贮藏与运输安全。3次检测结果表明，每两次的差值都在容许范围内，表明本次检测的短柄乌头种子样品净度为（90.1～92.0）%。但短柄乌头种子质脆，在脱壳过程中易受损伤，脱壳后的种子中混有细茎残体、果皮，不易分离，生产中只要求达到80%左右即可。
表1种子净度测定结果
供试样品
（g）测定
次数优质种子
重（g）废种子、杂
质重（g）净纯度
（%）差值平均值
（%）
4.0913.6850.40590.11.9
4.0823.7900.29092.91.291.9
4.0933.7910.29992.70.9
注：容许差值<2.59%
2.3种子千粒重种子千粒重是指在风干状态下1000粒净种子的重量，千粒重是衡量种子活力的重要指标之一，粒大、饱满充实的种子，其内部贮藏的营养物质多，发芽整齐，出苗率高，幼苗健壮。测定千粒重是鉴别种子大小，饱满程度非常简便的方法。测试结果见表2。从表2看出，每两次检测的差值在容许差值内，短柄乌头种子千粒重在2.19g～2.30g左右。 表2短柄乌头种子千粒重测定结果
重复次数千粒重
（g）差值平均值
（g）差值占平均重量的
百分数（%）
12.160.093.9
22.280.032.2571.3
32.330.062.6
注：容许差值<5.0%
2.4种子含水量种子含水量的高低直接影响种子贮藏、运输安全，进而影响种子生活力的高低，测定种子含水量，可为其安全贮藏、运输提供依据。检测结果见表3。
表3短柄乌头种子含水量的测定结果
重复次数种子干重（g）水分重量（g）含水量（%）平均值（%）
12.280.24810.9
22.290.24710.810.8
32.330.24910.7
注：容许差值<0.2%
从表3可见，两次检测的差值在容许差值范围内，表明短柄乌头种子的含水量为10.7%～10.9%。
2.5种子发芽率和发芽势发芽率是衡量种子质量的重要指标之一，种子能否正常发芽是衡量种子是否具有生活力的直接指标，也是决定田间出苗率的重要因素，对确定合理的播种量、改进种子贮藏方法和确定合理的种子价格等起着决定性作用。发芽势是指发芽试验初期，规定日期内正常发芽的种子数占供试种子的百分率。种子发芽势高，表示种子生活力强，发芽整齐，出苗一致。检测结果为：种子发芽率为85.3%～88.4%，发芽势为54.9～57.4%。
表4短柄乌头种子的发芽率和发芽势
供试种子
（粒）发芽数霉烂数未发芽数发芽率
（%）差值发芽势
（%）
1028713285.3454.9
1008712187.0356.0
1089611188.9157.4
平均90121.3387.07—56.1
注：发芽势为发芽8d发芽数/供试种子数，容许差值<5.0%
表5短柄乌头种子质量分级标准
等级净度
（%）含水量
（%）千粒重
（g）发芽率
（%）外形特征
Ⅰ≥90≤10.86≥2.35≥90饱满，大小均匀，无破损
Ⅱ≥85≤10.86≥2.20≥85较饱满，大小较均匀，无破损
Ⅲ≥80≤10.86≥2.10≥70饱满程度一般，大小较均匀，无破损
3结论与讨论
3.1种子分级标准因短柄乌头种子质量分级目前还没有国家标准和地方标准，本试验严格按照《农作物种子检验规程》及有关种子分级方法，其结果可作为短柄乌头种子质量分级标准的参考。根据以上分级标准。种子可视为劣种，不能销售。
3.2讨论种子质量是决定中药材质量的重要因素，是促进中药材生产发展的重要保证。对种子质量的监控，保证种子质量，是进行中药材标准化生产的重要措施。本文提供的短柄乌头种子分级标准是在试验研究的基础上提出的，是短柄乌头生产质量管理的组成部分。可供有关部门对短柄乌头种子进行质量评价时参考。
参考文献：
[1]中国科学院植物志编辑委员会.中国植物志[M].第二十七卷.北京：科学出版社，1979：318-319.
[2]全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编[M].北京：人民卫生出版社，1973：703-704.
[3]陈永康，刘茂坤.家种与野生雪上一枝蒿总生物碱毒性与药理的比较研究[J].中国民族民间医药杂志，1997，24：38-42.
[4]袁理春，赵琪，陈翠，等.雪上一枝蒿繁殖技术初步研究[J].中药材，2003，27（4）：240-241.
[5]中华人民共和国国家标准（GB/T3543.1～3543.7-1995），农作物种子检验规程.
[6]秦佳梅，张卫东，刘凤莲.返魂草种子质量标准研究[J].种子，2006，25（12）：100-101.
[7]张国容，张进玉.乌拉尔甘草种子种苗分级标准制定[J].现代中药研究与实践，2004，18（5）：14-16.
（收稿日期：2014-02-20）