广西HIV-1 B亚型假病毒的构建

来源 :实用医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：swb39274355

【摘要】

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目的针对广西HIV-1 B亚型毒株构建一种优化的假病毒耐药检测模型,为表型耐药检测提供成本较低、简便易行的研究工具。方法从质粒pSV-EGFP中扩增出EGFP基因,采用双酶切法将EGF

【作者】

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黄春湲王洪梁浩叶力梁冰玉蒋俊俊陈荣凤宁传艺廖

【机构】

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广西医科大学公共卫生学院&,广西艾滋病防治研究重点实验室,广西壮族自治区医学科学信息研究所,广西医科大学生命科学院&,广西艾滋病防治研究重点实验室

【出处】

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实用医学杂志

【发表日期】

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2018年12期

【关键词】

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HIV-1 假病毒耐药检测 HIV-1 pseudovirus drug-resistance detection

【基金项目】

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国家自然科学基金项目（编号：81360259,81660334）, 广西自然科学基金项目（编号：2017GXNSFAA198190）

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目的针对广西HIV-1 B亚型毒株构建一种优化的假病毒耐药检测模型,为表型耐药检测提供成本较低、简便易行的研究工具。方法从质粒pSV-EGFP中扩增出EGFP基因,采用双酶切法将EGFP基因克隆至骨架质粒pNL4-3.Luc.E-R-,以此构建假病毒重组骨架质粒;采用RT-PCR方法从HIV-1 B亚型慢性感染者RNA中获得包膜蛋白基因,采用双酶切法将env基因克隆至真核表达质粒pc DNATM3.1（＋）,以此构建重组包膜质粒;单转染重组包膜质粒至293t细胞验证表达;共转染重组质粒至293t细胞获得假

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