【摘 要】
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目的构建包含rNIS和eGFP基因的重组腺病毒载体及初步应用。方法以CMV为启动子,将pShuttle-eGFP-CMV重组穿梭载体和含有目的基因rNIS的原始质粒酶切后,电泳、切胶回收,分别得
【机 构】
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中南大学湘雅医院核医学科,华中科技大学同济医学院附属协和医院核医学科
【基金项目】
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中国博士后基金资助项目(No:20090450935);湖南省科技厅基金项目(No:08FJ3167)
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目的构建包含rNIS和eGFP基因的重组腺病毒载体及初步应用。方法以CMV为启动子,将pShuttle-eGFP-CMV重组穿梭载体和含有目的基因rNIS的原始质粒酶切后,电泳、切胶回收,分别得到载体片段和插入片段。连接酶连接两种片段后,转化化学感受态DH5a菌株,涂布到抗性固体培养基中;挑取单克隆菌落,接种到抗性液体培养基培养;提取pShuttle-eGFP-CMV-rNIS重组穿梭质粒,酶切鉴定。用类似的方法将pShuttle-eGFP-CMV-rNIS重组穿梭质粒转移到pAdxsi重组腺病毒骨架载体
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