【摘 要】
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目的 从全人源抗鼻咽癌噬菌体抗体库中筛选特异性单链抗体(ScFv),并对其特异性进行鉴定.方法 通过噬菌体表面展示技术把ScFv表达在噬菌体表面,以鼻咽癌细胞作为抗原,用抗原递
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)
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目的 从全人源抗鼻咽癌噬菌体抗体库中筛选特异性单链抗体(ScFv),并对其特异性进行鉴定.方法 通过噬菌体表面展示技术把ScFv表达在噬菌体表面,以鼻咽癌细胞作为抗原,用抗原递减法,通过"吸附-洗脱-扩增"过程筛选并富集特异性抗体,及ELISA筛选,获得特异阳性克隆进行免疫组化鉴定并测序.结果 通过对抗体库进行三轮正负淘洗和富集后,随机挑选4212个克隆进行ELISA,发现3个克隆对CNE2呈强阳性反应,而与人正常细胞系HUVEC等呈弱阳性反应或不反应.对克隆HNSAO33进一步进行免疫细胞化学验证,结果与ELISA反应一致;免疫组织化学鉴定表明克隆HNSAO33与鼻咽癌组织和鼻咽组织阳性率的差别有统计学意义.结论 通过淘选富集、ELISA和免疫化学鉴定获得特异性较强的噬菌体克隆,为鼻咽癌发病机制的研究和临床诊断以及治疗奠定了基础.
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