脐带干细胞分化为心肌样细胞的实验研究

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目的 研究5-氮胞苷能否诱导脐带干细胞向心肌细胞分化.方法 取无污染的足月剖宫产健康胎儿脐带,采用胶原酶胰酶消化法分离脐带干细胞.取克隆化生长的4~6代脐带干细胞,经流式细胞仪和骨、脂肪细胞诱导鉴定后,采用5 μmol/L 5-氮胞苷作用24 h,对细胞进行诱导,连续观察5周,倒置显微镜下观察其形态变化.RT-PCR分析肌钙蛋白T基因的表达,免疫细胞化学鉴定心肌特异性肌球蛋白、肌动蛋白α-actin的表达,电镜对细胞的超微结构进行分析.结果 诱导后,细胞的形态不断发生变化,但没有观察到可以跳动的心肌细胞.RT-PCR检测显示分化后的细胞表达心肌特异性基冈肌钙蛋白T,免疫组织化学发现诱导后的细胞表达心肌特异性肌球蛋白和α-肌动蛋白.电镜下观察,诱导4周后有明显的肌丝样结构形成.结论 脐带干细胞具有分化为心肌细胞的潜能,可作为心肌组织丁程和细胞移植研究新的干细胞来源。

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