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摘要：牛病毒性呼吸道疾病是由多种病原引起的以呼吸道症状为主的疾病。其病因的复杂化导致本病在临床上难于治疗，给牛场造成严重的经济损失，也导致养牛业的巨大风险，因此需要在养殖过程中重点防范。该文将针对牛病毒性呼吸道疾病的诊断方法和防治方法进行总结和归纳。
关键词：牛;病毒性呼吸道疾病;诊断
中图分类号：S858.23
文献标识码：B
doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2019.22.035
0引言
牛病毒性呼吸道疾病给养牛业造成的危害十分巨大，其具有很高的发病率和死亡率。其发病不仅有多种病原，还含有多种诱因。在临床上不注意就会发病，导致病牛出现死亡。
1疾病简介
本病主要的发病对象为犊牛、奶牛及育肥肉牛，其高发季节为秋冬两季[1]。主要是由于传染性病原引起，包括病毒、细菌和支原体[2]。环境因素和应激因素也是本病发生的主要诱因，常见的诱因有温度忽高忽低、养殖场养殖密度过大、环境中湿度过高、环境中噪音较大、断奶应激以及运输过程的问题。而且随着过内养殖场不断从国外的一些养殖场引进品种，造成本病发生的病原体的种类也随之出现增加，也导致本病不断复杂化。不仅在诊断中趋于复杂，而且在防治中情况也越来越复杂，不利于对本病预防。目前本病的主要病原有以下几种，分别是牛病毒性腹泻病毒、牛副流感病毒、牛传染性鼻气管炎病毒和牛呼吸道合胞体病毒以及牛2型腺病毒。当牛感染这些病毒后，会使牛免疫系统被病原所抑制，还会对牛的呼吸道中的上皮细胞形成危害，发生病理性反应。
2诊断方法
本病的诊断通过临床症状和病理变化不能做出确诊，需要通过实验室技术进行确诊，确诊的具体方法分为病毒分离鉴定、病毒核酸鉴定、血清学鉴定方法、其他检测方法。
2.1病毒分离鉴定
病毒分离鉴定是应用牛肾细胞进行培养，在临床剖检时采集病料后在这些细胞上培养，采集病料时要注意病料的种类和位置，种类有鼻腔分泌物，可以应用鼻腔拭子采集。气管的病变以及肺部的病变可以直接取病料，注意采集发病部位和正常部位相交的位置，还可以采集病牛的血液供检测，有的疾病还可以通过对脾脏的采集来分离。牛病毒性腹泻病毒具有2种病变类型：致细胞病变型（°CP）和非致细胞病变型（nCP）[3]。其中致细胞病变型能够导致感染细胞的胞浆内产生空泡，胞浆变成圆形，最后细胞会逐渐死亡。而临床上发现更多的是非致細胞病变型。本病毒通过对血液的培养能够分离到，其常存活于血液内的单核细胞内。在鉴定中应与牛传染性鼻气管炎病毒进行区别。牛副流感病毒3型能使牛肾的单层细胞呈现出拉网状，并从细胞壁上脱落。本病毒可以吸附牛和豚鼠的红细胞，所以可以通过此实验确定有无病毒存在。牛呼吸道合胞体病毒能在呼吸系统的细胞的培养物中良好生长。通常在实验中大多应用牛的鼻甲细胞进行此病毒培养。培养后可见病变细胞出现融合，有的呈现出气球样，在细胞生长发育晚期，可见其开始出现肿大和聚集的现象，最后会变得坏死和脱落。
2.2病毒核酸鉴定
病毒核酸鉴定具有高敏感性，高特异性，通过对病毒粒子的核基因组DNA或者RNA等进行检测确定病毒是否存在，也可以确定本病发病的病原体。核酸鉴定常用的方法有RT一P°CR方法，有实时荧光定量P°CR法。这些方法的应用能显著提升病毒检测的灵敏性。应用本方法能缩短诊断时间，通常从病原分离到结果出来仅需要几个小时就可以得出结果。本方法主要是通过GenBank上面公布的核酸序列设计相应引物，应用引物并根据相应的反应条件从而建立检测方法，可以检测出病料中是否感染有某种特定的病原体。
2.3血清学鉴定方法
血清学方法是在诊断中比较常用的一种方法，在这类方法中可以应用的具体方法较多，常见的是病毒中和试验、免疫荧光试验、酶联免疫吸附试验和胶体金检测试验等。通过应用这些技术也能达到对病原的快速鉴定，进而达到对疾病的快速诊断。病毒中和试验是检测特异性抗体。本文研究的几种病毒均可以通过中和试验进行检测。试验是将病毒和已经稀释后的血清进行作用，血清需要倍比稀释，两者在作用1h后可以添加进人一些指示性细胞，在379°C中进行恒温培养，在4～5d后就可以对其进行读数。在读数时能阻止50%的细胞发生病变的血清的最大稀释度为此次检测抗体的效价。本试验具有较高的敏感性和特异性，但试验时间较长，受到的干扰因素也较多。免疫荧光试验是对病原进行直接检查的一种重要的技术手段。其应用具有一定的限定性，如在牛病毒性腹泻病毒的鉴定中不适合应用。本方法的应用需要具有相对较高的技术水平和应用试剂，不能进行大量样本检测。酶联免疫吸附试验是一种可以对抗原和抗体均检测的技术。目前已经得到广泛应用，尤其是在进行流行病学调查时应用不仅能快速诊断，而且操作技术相对较为简单方便，适合于在临床上应用。本方法常用的就是普通ELISA，还可以应用双抗体.夹心的ELISA和间接ELISA等。本方法与病毒中和试验进行比较，可以发现具有快速和敏感的特征。胶体金技术也具有方便、快捷和敏感的特征。在临床上也具有相当多应用。胶体金技术中常见的有胶体金免疫渗滤法和胶体金免疫层析法。目前已经得到广泛应用。现在已经研制出牛病毒性腹泻病毒的胶体金试纸，是利用抗原制备的试纸条，可以用来检测抗体。
2.4其他检测方法
常见的有多重RT-PCR技术、固相和液相的芯片以及多重胶体金检测技术。目前还有人在研究反转录PCR-ELISA技术，这项技术的应用可以同时检测人类的9种呼吸道病原体。而且具有较高的灵敏度和特异性，所以对牛的病毒性呼吸道疾病也可以研制此方法进行检测。
3防治措施
本病预防还是需要通过加强饲养管理。在养殖中，应采用自繁自养的模式，避免从其他地方引种，这样可以避免在引种的过程中将病原体同时带进养殖场。如果确实需要引种，应对所引进的牛检疫，在引进养殖场后还需要对其隔离观察，待隔离30d后，如果没有发病，方可混群饲养。在日常饲养管理中，要保持合理的牛群密度，不能过于拥挤。对不同年龄和不同来源的牛要分群饲养。牛舍要勤打扫，勤出粪，还要制定相应的消毒制度。按照制度定期消毒，在消毒时必须要做到全面，不能留有死角。消毒液要轮换使用，避免同一种消毒液让病毒产生耐药性。还要对进人养殖区的人员和车辆以及各种器具消毒。防止病原体被带人养殖场，导致牛群感染发病。牛舍要保持相对稳定的温湿度。尤其是在夏季和冬季要具有相应的措施维持温度。还需要有通风条件，以便能将有害气体排出。给牛饲喂良好的粗、精饲料和清洁的饮水。确保牛每天能摄取均衡营养物质供自身需求。
4结束语
在养殖中还需要避免各种应激因素，防止牛群发生应激。本病是由病毒引起，没有特效药物，治疗是通过对症治疗和提高免疫力促使其康复。
参考文献
[1]梁立华，牛病毒性呼吸道疾病诊断技术探析[J].当代畜牧，2015（29）：62-63.
[2]李鹏，张淑琴，温永俊，等.牛病毒性呼吸道疾病诊断技术研究进展[J].动物医学进展，2013，34（4）：90-93.
[3]孔祥明.牛病毒性呼吸道疾病诊断技术[J].湖北畜牧兽医，2014，35（11）：48-49.
关键词：牛;病毒性呼吸道疾病;诊断
中图分类号：S858.23
文献标识码：B
doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2019.22.035
0引言
牛病毒性呼吸道疾病给养牛业造成的危害十分巨大，其具有很高的发病率和死亡率。其发病不仅有多种病原，还含有多种诱因。在临床上不注意就会发病，导致病牛出现死亡。
1疾病简介
本病主要的发病对象为犊牛、奶牛及育肥肉牛，其高发季节为秋冬两季[1]。主要是由于传染性病原引起，包括病毒、细菌和支原体[2]。环境因素和应激因素也是本病发生的主要诱因，常见的诱因有温度忽高忽低、养殖场养殖密度过大、环境中湿度过高、环境中噪音较大、断奶应激以及运输过程的问题。而且随着过内养殖场不断从国外的一些养殖场引进品种，造成本病发生的病原体的种类也随之出现增加，也导致本病不断复杂化。不仅在诊断中趋于复杂，而且在防治中情况也越来越复杂，不利于对本病预防。目前本病的主要病原有以下几种，分别是牛病毒性腹泻病毒、牛副流感病毒、牛传染性鼻气管炎病毒和牛呼吸道合胞体病毒以及牛2型腺病毒。当牛感染这些病毒后，会使牛免疫系统被病原所抑制，还会对牛的呼吸道中的上皮细胞形成危害，发生病理性反应。
2诊断方法
本病的诊断通过临床症状和病理变化不能做出确诊，需要通过实验室技术进行确诊，确诊的具体方法分为病毒分离鉴定、病毒核酸鉴定、血清学鉴定方法、其他检测方法。
2.1病毒分离鉴定
病毒分离鉴定是应用牛肾细胞进行培养，在临床剖检时采集病料后在这些细胞上培养，采集病料时要注意病料的种类和位置，种类有鼻腔分泌物，可以应用鼻腔拭子采集。气管的病变以及肺部的病变可以直接取病料，注意采集发病部位和正常部位相交的位置，还可以采集病牛的血液供检测，有的疾病还可以通过对脾脏的采集来分离。牛病毒性腹泻病毒具有2种病变类型：致细胞病变型（°CP）和非致细胞病变型（nCP）[3]。其中致细胞病变型能够导致感染细胞的胞浆内产生空泡，胞浆变成圆形，最后细胞会逐渐死亡。而临床上发现更多的是非致細胞病变型。本病毒通过对血液的培养能够分离到，其常存活于血液内的单核细胞内。在鉴定中应与牛传染性鼻气管炎病毒进行区别。牛副流感病毒3型能使牛肾的单层细胞呈现出拉网状，并从细胞壁上脱落。本病毒可以吸附牛和豚鼠的红细胞，所以可以通过此实验确定有无病毒存在。牛呼吸道合胞体病毒能在呼吸系统的细胞的培养物中良好生长。通常在实验中大多应用牛的鼻甲细胞进行此病毒培养。培养后可见病变细胞出现融合，有的呈现出气球样，在细胞生长发育晚期，可见其开始出现肿大和聚集的现象，最后会变得坏死和脱落。
2.2病毒核酸鉴定
病毒核酸鉴定具有高敏感性，高特异性，通过对病毒粒子的核基因组DNA或者RNA等进行检测确定病毒是否存在，也可以确定本病发病的病原体。核酸鉴定常用的方法有RT一P°CR方法，有实时荧光定量P°CR法。这些方法的应用能显著提升病毒检测的灵敏性。应用本方法能缩短诊断时间，通常从病原分离到结果出来仅需要几个小时就可以得出结果。本方法主要是通过GenBank上面公布的核酸序列设计相应引物，应用引物并根据相应的反应条件从而建立检测方法，可以检测出病料中是否感染有某种特定的病原体。
2.3血清学鉴定方法
血清学方法是在诊断中比较常用的一种方法，在这类方法中可以应用的具体方法较多，常见的是病毒中和试验、免疫荧光试验、酶联免疫吸附试验和胶体金检测试验等。通过应用这些技术也能达到对病原的快速鉴定，进而达到对疾病的快速诊断。病毒中和试验是检测特异性抗体。本文研究的几种病毒均可以通过中和试验进行检测。试验是将病毒和已经稀释后的血清进行作用，血清需要倍比稀释，两者在作用1h后可以添加进人一些指示性细胞，在379°C中进行恒温培养，在4～5d后就可以对其进行读数。在读数时能阻止50%的细胞发生病变的血清的最大稀释度为此次检测抗体的效价。本试验具有较高的敏感性和特异性，但试验时间较长，受到的干扰因素也较多。免疫荧光试验是对病原进行直接检查的一种重要的技术手段。其应用具有一定的限定性，如在牛病毒性腹泻病毒的鉴定中不适合应用。本方法的应用需要具有相对较高的技术水平和应用试剂，不能进行大量样本检测。酶联免疫吸附试验是一种可以对抗原和抗体均检测的技术。目前已经得到广泛应用，尤其是在进行流行病学调查时应用不仅能快速诊断，而且操作技术相对较为简单方便，适合于在临床上应用。本方法常用的就是普通ELISA，还可以应用双抗体.夹心的ELISA和间接ELISA等。本方法与病毒中和试验进行比较，可以发现具有快速和敏感的特征。胶体金技术也具有方便、快捷和敏感的特征。在临床上也具有相当多应用。胶体金技术中常见的有胶体金免疫渗滤法和胶体金免疫层析法。目前已经得到广泛应用。现在已经研制出牛病毒性腹泻病毒的胶体金试纸，是利用抗原制备的试纸条，可以用来检测抗体。
2.4其他检测方法
常见的有多重RT-PCR技术、固相和液相的芯片以及多重胶体金检测技术。目前还有人在研究反转录PCR-ELISA技术，这项技术的应用可以同时检测人类的9种呼吸道病原体。而且具有较高的灵敏度和特异性，所以对牛的病毒性呼吸道疾病也可以研制此方法进行检测。
3防治措施
本病预防还是需要通过加强饲养管理。在养殖中，应采用自繁自养的模式，避免从其他地方引种，这样可以避免在引种的过程中将病原体同时带进养殖场。如果确实需要引种，应对所引进的牛检疫，在引进养殖场后还需要对其隔离观察，待隔离30d后，如果没有发病，方可混群饲养。在日常饲养管理中，要保持合理的牛群密度，不能过于拥挤。对不同年龄和不同来源的牛要分群饲养。牛舍要勤打扫，勤出粪，还要制定相应的消毒制度。按照制度定期消毒，在消毒时必须要做到全面，不能留有死角。消毒液要轮换使用，避免同一种消毒液让病毒产生耐药性。还要对进人养殖区的人员和车辆以及各种器具消毒。防止病原体被带人养殖场，导致牛群感染发病。牛舍要保持相对稳定的温湿度。尤其是在夏季和冬季要具有相应的措施维持温度。还需要有通风条件，以便能将有害气体排出。给牛饲喂良好的粗、精饲料和清洁的饮水。确保牛每天能摄取均衡营养物质供自身需求。
4结束语
在养殖中还需要避免各种应激因素，防止牛群发生应激。本病是由病毒引起，没有特效药物，治疗是通过对症治疗和提高免疫力促使其康复。
参考文献
[1]梁立华，牛病毒性呼吸道疾病诊断技术探析[J].当代畜牧，2015（29）：62-63.
[2]李鹏，张淑琴，温永俊，等.牛病毒性呼吸道疾病诊断技术研究进展[J].动物医学进展，2013，34（4）：90-93.
[3]孔祥明.牛病毒性呼吸道疾病诊断技术[J].湖北畜牧兽医，2014，35（11）：48-49.