【摘 要】
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目的 探讨Omi/HtrA2短发夹RNA(shRNA)对缺氧/复氧诱导大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)凋亡的作用及机制.方法 细胞分为5组:正常组(常规培养),模型组(缺氧/复氧组)、HK组(转染重
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目的 探讨Omi/HtrA2短发夹RNA(shRNA)对缺氧/复氧诱导大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)凋亡的作用及机制.方法 细胞分为5组:正常组(常规培养),模型组(缺氧/复氧组)、HK组(转染重组质粒Pgenesfl1/HK)、shRNA1组(转染Pgenesil-1/Omi/HtrA2 shRNA1)、shRNA2组(转染Pgenesil-1/Omi/HtrA2 shRNA2).用荧光显微镜观察荧光蛋白的表达,Western blot检测各组Omi/HtrA2、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(caspase)-3/-9蛋白表达,比色法测定caspase-3/-9的活性.结果 在荧光显微镜下,转染组细胞均可见绿色荧光,未转染组未见绿色荧光.与模型组相比,shRNA1组和8hRNA2组Omi/HtrA2、caspase-3/-9蛋白表达明显减少(P＜0.01).模型组和HK组、shRNA1组和shRNA2组之间Omi/HtrA2、caspase-3/-9蛋白表达差异无统计学意义.与正常组相比,模型组Omi/HtrA2、caspase-3/-9蛋白表达明显增强(P＜0.01).结论 Pgenesil-1/Omi/HtrA2 shRNA1和Pgenesil-1/Omi/HtrA2 shRNA2能明显减少缺氧/复氧诱导的NRK-52E中Omi/HtrA2蛋白的表达.通过抑制procaspase-9的活化,进而减少了下游procaspase-3的激活,最终减轻了缺氧/复氧诱导的NRK-52E的凋亡程度.
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