人B7-H3基因转染及其生物学功能的研究

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B7-H3是新近发现的B7家族新成员.为探讨其体外生物学功能及单克隆抗体的研制构建了B7-H3基因转染细胞.利用PCR的方法扩增出B7-H3基因,继而插入逆转录病毒载体pGEZ-Term,重组逆转录病毒载体与两个辅助病毒载体脂质体法共转染包装细胞293T,经用含有完整病毒颗粒的293T细胞的培养上清感染L929细胞,Zeocin筛选获得B7-H3的基因转染细胞.RT-PCR、Western blot和流式细胞仪表型分析等方法鉴定表明,B7-H3/L929基因转染细胞能稳定表达人B7-H3蛋白.继而基因转染
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