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对5-氨基荧光素的合成进行了系统的研究。以4-硝基邻苯二甲酸、间苯二酚、氯化锌为原料合成硝基荧光素，收率为85．0％；再分别采用硫化钠和硫氢化钠混合物，多硫化钠、氯化亚锡、氢气和骨架镍还原所得硝基荧光素混合物，得到5（6）-氨基荧光素混合物；在质量分数为6％的盐酸中重结晶分离得到了5位和6位氨基荧光素异构体，其收率分别为39．6％和14．5％。用荧光分光光度计测定了5-氨基荧光素的荧光强度、最大激发波长和最大吸收波长。同时用HPLC检测了产物纯度，产物结构经红外光谱、核磁共振谱、质谱确证。