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支原体和大肠杆菌是奶牛乳房炎的主要致病菌,在环境中广泛存在。本文从一例有临床症状的奶牛乳房炎乳样中经细菌分离染色纯培养,采用全自动细菌鉴定仪进行鉴定,鉴定为大肠杆菌感染(符合率为99%)。同时对乳样采用四联牛乳房炎荧光定量PCR法诊断,3份样品中2份支原体阳性(Ct为24和27),综合细菌分离鉴定和核酸检测实验证实该乳房炎为支原体和大肠杆菌混合感染。