小鼠MEF的制备及ES细胞的分离培养试验

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本试验采用两种方法制备小鼠胎儿成纤维细胞饲养层(mouse embryonic fibroblast, MEF),两种方法的差别在于用丝裂霉素-C(mitomycine-C,MMC)处理后,一种是用PBS-洗净MMC后直接使用;另一种是丝裂霉素-C处理后,用胰酶消化后重新接种,待细胞融合后再使用.将获得的小鼠胚胎直接接种在MEF上,分别在5~6d后取增殖的ICM团块,消化再接种培养,观察胚胎干细胞(embryonic stem cell, ES细胞)样集落的生长情况,并对获得的ES细胞样集落进行碱性磷酸酶
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