【摘 要】
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目的:建立和完善石蜡组织RNA提取的方法。方法:收集临床病理诊断用石蜡包埋组织块共100例,经RNA灭活处理后,进行组织切片、脱蜡、清洗、消化等一系列提取前预处理,用TRIZOL试
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目的:建立和完善石蜡组织RNA提取的方法。方法:收集临床病理诊断用石蜡包埋组织块共100例,经RNA灭活处理后,进行组织切片、脱蜡、清洗、消化等一系列提取前预处理,用TRIZOL试剂提取组织的RNA,并在-20℃长时间沉淀RNA。对提取的RNA以核酸测定仪检测RNA的浓度和纯度,并通过RT-PCR检查提取RNA的β-actin基因,以检测提取RNA的质量。结果:100例石蜡包埋组织中提取的RNA经过核酸测定仪测定后,浓度在20~50mmol/L,260nm及280nm光密度比在1.75~2.0;经过RT-PCR反应,提取的RNA都能扩增出190bp的β-actin目的片段。结论:通过RNA提取前对材料的一系列合理处理,从福尔马林固定、石蜡包埋档案组织材料中提取小片段RNA进行目的基因mRNA检测,可以成为一种稳定成熟的方法应用于临床病理诊断。
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