【摘 要】
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OBJECTIVE:To evaluate the efficacy of Liuwei Di-huang formula(六味地黄方,LWDHF)on endo-thelial cells,and to study the mechanism behind the action of modulating
【机 构】
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Collage of Pharmacy,Nan-jing University of Chinese Medicine,Nanjing 210023,China;Collage of Pharmacy
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OBJECTIVE:To evaluate the efficacy of Liuwei Di-huang formula(六味地黄方,LWDHF)on endo-thelial cells,and to study the mechanism behind the action of modulating expression of estrogen receptors.METHODS:Hydrogen peroxide(H2O2)was applied to induce the apoptosis of human umbilical vein endothelial cells(HUVECs).The concentration of ni-tric oxide(NO),endothelial nitric oxide synthase(eNOS)and inducible NOS(iNOS)were measured by assay kits.Western blot and real-time poly-merase chain reaction(RT-PCR)were used to detect the expression of iNOS,eNOS,b-cell lymphoma-2(Bcl-2),Bcl-2-associated X protein(Bax),estrogen re-ceptor(ER)αand ERβ.Also,small interfering RNA(siRNA)was involved to confirm whether the pro-tective effects of LWDHF was medicated by ERs.In vivo,the female rats were ovariectomized to estab-lish postmenopausal vascular injury model.Then the model rats were divided into three groups and treated with saline,estradiol and LWDHF respec-tively.The concentration of NO and NOS in serum were measured by assay kits,and the expression of Bax,Bcl-2,ERαand ERβwere detected by western blot and immunohistochemistry.RESULTS:In vitro study,LWDHF significantly pro-tected HUVECs from H2O2-induced apoptosis,with the increase of Bcl-2 and the decrease of Bax.The treatment with LWDHF inhibited concentration of NO and iNOS,and upregulated the expression of eNOS,ERαand ERβ.In addition,ERαsiRNA could block the protective effects of LWDHF,while ERβsiRNA showed little influence.In vivo,the treatment with LWDHF suppressed the vascular injury and re-duced the level of NO and NOS.LWDHF increased the expression of Bcl-2,ERαand ERβ,as well as in-hibiting the Bax expression.CONCLUSION:LWDHF could improve endothelial function and protect HUVECs from apoptosis via in-creasing the expression of ERα.
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